定量PCR仪

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定量PCR仪也称医用PCR分析系统,PCR扩增仪,定量PCR仪，实时荧光定量pcr仪等。医流商城定量PCR分类包含医疗器械分类目录6840-08临床检验分析仪器|基因和生命科学仪器|医用PCR分析系统，Ⅲ类管理，此类别有定量功能的pcr仪；也包含医疗器械分类目录6840-08临床检验分析仪器|基因和生命科学仪器|PCR扩增仪，Ⅱ类管理，此类别无定量功能。Ⅱ类PCR扩增仪随着技术的发展，已逐步被淘汰，所以商城定量PCR主要产品是Ⅲ类医用PCR分析系统。与生物器材分类中的基因扩增仪主要区别是生物器材中基因扩增

定量PCR仪

中文名

聚合酶链锁反应

外文名

Polymerase chain reaction

简称: PCR
用途: 用于扩增特定的DNA片段

PCR扩增仪历史发展

PCR这项技术是由凯利?穆利斯(Kary Mullis)发明，并因此在七年之后，1993年10月，获得了诺贝尔化学奖该项殊荣。穆利斯的想法是，利用一种人工方法，和反复相同程序的方法，并利用一种特殊的酶即DNA聚合酶来扩增特定的DNA片段。

DNA聚合酶天然存在于生物体内，在细胞分裂前进行DNA的复制。当DNA开始复制时，解旋酶将双股的DNA分开成两个单股。DNA聚合酶便结合在两DNA单股链上，生成互补链。在穆利斯最初的PCR反应中，将DNA聚合酶用于体外试验。双链DNA被加热到96℃，使得双链分离成为两条单链。但是在这个温度下，DNA聚合酶被破坏，因此在每个循环的加热步骤后必须补充新的聚合酶。穆利斯的原始PCR反应效率极低，需要大量时间和DNA聚合酶，并且在整个PCR反应中都需要人来照看。

后来，由嗜热细菌水生栖热菌(Thermus aquaticus)体内产生的DNA聚合酶改善了这种低效的PCR反应。由于嗜热细菌生活在温度达到50至80 °C (122至176 °F)的间歇泉中，它的DNA聚合酶具有耐热性。在用于PCR反应时，高温并不能破坏这种DNA聚合酶，因此不需要不断加入新的聚合酶，PCR反应由此变得简单并且可以由机器操作。

最初的具有耐热性的DNA聚合酶来自于水生栖热菌(Thermus aquaticus)，因此被称为Taq。Taq酶被广泛用于当前的PCR操作中。Taq酶的缺点是它缺少3'->5'校正外切酶活性，因此在复制DNA时有时会出错，造成DNA序列突变(错误)。从古菌中获得的Pwo酶及Pfu酶均有校正机制，能够大大降低PCR反应中的突变。将Taq与Pfu结合使用可以保证真实准确得扩增DNA。

PCR扩增仪操作过程

PCR用于扩增一小段已知的DNA片断，可能是单个基因，或者仅仅是某个基因的一部分。与活体生物不同的是，PCR只能复制很短的DNA片断，通常不超过10kbp。DNA是双链分子，因此用互补DNA双链的构造单位(核苷酸)来度量其大小，单位为碱基对（base pair, bp）。某些特定的方法可以扩增40kbp左右的片断，但是这种大小与真核细胞的染色体DNA相比仍然是很少的。例如，人的体细胞DNA含有大约30亿个碱基对。目前应用的PCR反应需要几个基本组成：

DNA模板（template），含有需要扩增的DNA片断。

2个引物（primer），决定了需要扩增的起始和终止位置。（见下面引物一节）

DNA聚合酶（polymerase），复制需要扩增的区域。

脱氧单核苷酸（dNTP），用于构造新的互补链。

缓冲体系，提供适合聚合酶行使功能的化学环境。

PCR反应在热循环设备中进行。PCR仪可以将反应管加热或冷却到每步反应所需的精确的温度。为防止反应体系中液体产生蒸气，通常在反应管上加盖加热的盖子(比加热板温度来的高)，或者在反应体系表面加入一层石蜡油。

PCR扩增仪国内主要生产厂商排名

随着生物技术的发展，国内涌现出一批优秀的PCR扩增仪厂商：

1、天津金思德生物技术有限公司

2、上海山富科学仪器有限公司

3、赛唯斯科技(北京)有限公司

其中天津金思德生物技术有限公司是一家拥有自主PCR基因扩增仪产品品牌及相关分子生物学试剂研发、生产和经营的高新技术公司

PCR扩增仪天津金思德研发新PCR扩增仪技术参数

加热板模块	96孔（012-103）
模块材料	铝制合金材料
升降温速度	2.5℃/sec,2.2℃/sec
温度均一性	≤±0.3℃
温度精确性	≤±0.01℃
温度范围	4.0℃～99.9℃
梯度温差范围	0-40℃
循环数	可达两个嵌套循环，每个循环最多可有99个步骤
显示屏	7寸彩色触摸屏800×480
按键	单独的数字键0-9，字母键和功能键在触摸屏上
在线帮助系统	可靠的实时在线帮助
文件夹	4层文件夹，密码保护，用户权限管理
暂停功能	手工暂停
断电重启	恢复供电后可以继续执行断电时未结束的程序
热盖温度范围	25℃～99.9℃
热盖加热速率	≥1℃/sec
热盖压力	最大压力120N
电压	85V~265V,50Hz~60Hz

PCR扩增仪步骤

一般的PCR反应由20到35个循环组成，每个循环包括以下3个步骤：

利用高温(93-98℃)使双链DNA分离(熔解)。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前，通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离，仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟。

在DNA双链分离后，降低温度使得引物可以结合于单链DNA上(降温或称接合)。此阶段的温度通常低于引子熔点5℃。错误的黏合温度可能

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导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。新技术的融合型核酸聚合酶在此阶段的温度会高于熔点3~5℃，仅需时间5~10秒。

最后，DNA聚合酶由降温时结合上的引子开始沿着DNA链合成互补链(延长)。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片断长度。传统的Taq估计合成1000bp大概需要1分钟、较新的Tbr(来自于嗜热菌Thermus brockianus)约40秒、融合型聚合酶仅约15秒。

PCR扩增仪PCR的应用

基因图谱建立

亲子鉴定

侦测遗传疾病

克隆基因

基因突变研究

DNA遗传演化

基因表现比较

注册号	国食药监械(进)字2007第2401578号^[1]?	生产厂商名称（中文）
产品性能结构及组成	该产品由热循环系统、光学系统、电脑和分析软件组成。	产品适用范围	该产品与试剂包连用，在医学临床上用于对患者血清、血浆等样品进行核酸定量检测。
注册代理	雅培制药有限公司北京办事处	售后服务机构	雅培制药有限公司北京办事处
批准日期	2007.08.30	有效期截止日	2011.08.29
生产厂商名称（英文）	Abbott Molecular,Inc.	生产厂地址（中文）	1300 E Touhy Avenue, Des Plains, IL 60018-3315
生产场所	1300 E Touhy Avenue, Des Plains, IL 60018-3315 Block 33,#05-03,Marsiling Industrial Eatate Road 3,Singapore 739256	生产国（中文）	美国
产品名称（中文）	PCR扩增仪^[2]?	产品名称（英文）	m2000rt RealTime PCR System
规格型号	m2000rt	产品标准	进口产品注册标准 YZB/USA 0172-2007《PCR扩增仪》

参考资料

1.国食药监械(进)字2007第2401578号?．国家食品药品监督管理局[引用日期2013-04-20]
2.PCR扩增仪?．国家食品药品监督管理局[引用日期2013-04-20]