求助固体培养基上的菌落，无法用液体培养基扩增...

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悬赏分：0 - 解决时间 2025-12-06 11:03

求助固体培养基上的菌落，无法用液体培养基扩增

dxy_mc067er5

举报 2017-06-30 20:39

质粒有没有导入感受态细胞？

dxy_mc067er5

举报 2017-06-27 09:45

你直接用质粒在固体培养基培养的？你有没有进行连接转化？

念123

举报 2017-06-24 15:27

固体琼脂板氨苄的问题。氨苄高温会失效

qq890914

举报 2017-07-03 09:45

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寻影

大家好，我是一个质粒小菜鸟，最近遇到个奇怪的事情，希望大家帮忙看看，究竟出了什么问题。
我构建了一个氨苄抗性的质粒，这个质粒在固体培养基里长出了单菌落，但是我挑菌在液体培养基里无法扩增出来。固体培养基和液体培养基一起配置的，氨苄浓度一致，唯一不同的是固体培养基里加入了琼脂。为了防止是氨苄的问题，我把这个固体培养基上的菌落挑划了新的板，依然能长出菌落。而同一次配置的液体培养基，也能扩增其他质粒，所以我实在想不出是什么其他问题，希望大家帮帮忙。

......

平板怎么倒的？配置好高压后，等冷却再加抗生素？还是高压前加的？

寻影	举报 2017-07-01 11:04 dxy_mc067er5 质粒有没有导入感受态细胞？这个是用氨苄筛选，长出来应该就是导入了(>﹏<)

寻影	举报 2017-07-03 18:01 dxy_mc067er5 你直接用质粒在固体培养基培养的？你有没有进行连接转化？进行连接转化了呀，DH5菌

寻影	举报 2017-07-01 19:34 念123 固体琼脂板氨苄的问题。氨苄高温会失效可是，作对照的那个板上一个菌都没有(>﹏<)