收藏  |   举报 2017-05-31 21:35   关注:198   回答:1

重组质粒酶切正确,测序正确,有微弱荧光,但是外源性抗体ant...

已解决 悬赏分:0 - 解决时间 2024-11-01 06:59
重组质粒酶切正确,测序正确,有微弱荧光,但是外源性抗体anti-Flag都砸不到!!
举报 2017-06-01 19:26


我的目的蛋白D2,是膜表达蛋白,构建了三种载体的重组质粒,分别为CMV,pcDNA3.1,pEGFP-N1,三个重组质粒酶切正确、测序正确,也曾表达过,可以砸出相应大小的目的条带。大提过后,有近一个半月没有进行转染表达,突然发现我的质粒不能砸出目的条带了,甚至外源性的anti-Flag都砸不到(pEGFP重组质粒转染可以观察到微弱荧光,比以前较少),已经重修小提过,也重新进行了酶切,进行测序,都没有问题,现在就是砸不到条带(阳性对照的Flag每次都可以),请各位大神帮忙!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!



网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报
 
免责声明:本站有部分内容来自互联网,如无意中侵犯了某个媒体 、公司 、企业或个人等的知识产权,请来电或致函告之,本网站将在规定时间内给予删除等相关处理。