怎样用重组表达蛋白制作多抗...

怎样用重组表达蛋白制作多抗

可以跑SDS-PAGE电泳，不插梳子，每次一块板子点样200ul，跑完了切胶，攒几次之后，用灭菌的研钵研磨，边磨边加PBS，注意不要加多了，一定要研磨得很细，研磨之后用1ml的注射器过一边，不堵塞说明就可以打兔子了。每次打兔子的胶不超过1.5ml，首次蛋白的量要高一些，400-500ug，以后两次减半，一般三次就可以了。我们实验室有人做过。
或者可以过柱纯化，过柱纯化要加一半的佐剂，所以纯化后浓度要高于500ug/ml为宜，否则要增加免疫的次数。