【求助】请问，用T4连接酶连接以后，做转化时，还需要酒精沉淀...

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悬赏分：0 - 解决时间 2025-12-06 14:36

【求助】请问，用T4连接酶连接以后，做转化时，还需要酒精沉淀吗？

举报 2008-06-26 04:35

我一般都是连接后直接用反应溶液进行转化的。

转化大肠杆菌时只要有50ng质粒转入细菌即可完成成功克隆，因而不必为此再次纯化。乙醇沉淀后反而损失很大，不一定能保证转化结果了。

举报 2008-06-27 16:54

直接转化就行了。

举报 2008-06-26 12:13

如果是电转化，就必须纯化；如果是化学转化，无需纯化。

举报 2008-06-20 15:14

我电转放2ul也不需要纯化，如果再多就需要了，否则会有电火花

举报 2008-06-26 11:54

粘性末端补平以后，要做连接，还需要纯化吗？可不可以直接用补平的反应液来做连接哪？

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