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TUNEL凋亡检测
石蜡切片/冰冻切片
egfr肾小球过滤医学计算器医友
[VIP第1年] 指数:3
通过重庆市工商行政管理局九龙坡区分局高新区局认证 
原位末端凋亡法（Tune
扫描电镜免疫组化、HE
多肽合成与修饰(Weste
蛋白双向电泳技术(Wes
细胞周期实验技术(原
基因合成技术服务(实
透射电镜免疫组化、HE
流式细胞仪进行细胞周| 服务名称： | 免疫荧光实验技术服务 |
免疫荧光实验技术服务
一、荧光免疫测定技术的概念：
将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记，试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后，测定复合物中的荧光素，这种免疫技术，称为免疫荧光素技术。
二、常见荧光素：
⑴FITC；⑵RB200；⑶TRITC；⑷镧系：Eu、Tb；⑸PE；⑹其它。
三、实验仪器与试剂
1、实验仪器：染色缸5个，玻片架1个，微波炉，湿盒，37℃恒温箱，锡箔纸
2、实验试剂：二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、无水酒精、30%双氧水、柠檬酸盐缓冲液（粉末，制备时候用双蒸水定容，调PH）、PBS、BSA（粉末，用PBS溶解）、一抗（可用BSA溶解）、二抗（可用BSA溶解）、甘油、丙酮、多聚甲醛、Triton X-100(用PBS制备)
四、实验步骤
石蜡包埋切片处理方法：
1.二甲苯Ⅰ浸泡20分钟
2.二甲苯Ⅱ浸泡20分钟
3.梯度酒精（100、95、75）%脱水各5分钟
4.双蒸水冲洗浸泡1次，5分钟
5.3%双氧水浸泡，室温5-10min，或37℃10min
6.抗原修复：切片浸入0.01M柠檬酸盐缓冲液（PH6.0），微波炉加热至沸腾后断电。自然冷却至室温。
7.PBS冲洗2次，每次3分钟
8.滴加5%BSA封闭液，室温20min
9.甩去多余液体不洗
10.滴加适当稀释的一抗，超过组织边缘2mm，置于湿盒内4℃过夜或者37℃1小时或20℃2小时
11.取湿盒于37℃温箱复温，30min
12.滴加二抗，37℃温箱孵育1小时（避光操作和存放）
13.PBS冲洗3次，每次2分钟
14.甘油封片，甘油：水=1：1或甘油：PBS=9：1
15.4℃保存，最好及时激光共聚焦拍照
冰冻切片处理方法：
1.冰丙酮浸泡30s，自然晾干
2.滴加5%BSA封闭液，室温20min
3.甩去多余液体不洗
4.滴加适当稀释的一抗，超过组织边缘2mm，置于湿盒内4℃过夜或者37℃1小时或20℃2小时
5.取湿盒于37℃温箱复温，30min
6.滴加二抗，37℃温箱孵育1小时（避光操作和存放）
7.PBS冲洗3次，每次2分钟
8.甘油封片，甘油：水=1：1或甘油：PBS=9：1
9.4℃保存，最好及时激光共聚焦拍照
五、服务流程：
【本平台合作项目】
分子诊断、病理诊断、药效学评价、毒理学实验、细胞药筛、动物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因编辑、病理检测、基因芯片、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！
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