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HPDE6-C7(HPDE6-C7) ;人正常胰腺导管上皮细胞

产品价格: ¥680.00

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发货时限:
暂无
所在地区:
中国上海
有效期至:
长期有效
最后更新:
2020-08-06 02:00:02
浏览次数:
19

产品详情

品牌名称:
ATCC,ECACC,ScienCell, DSMZ, RIKEN
货号: AE-H296
供应商: 上海钰博生物科技有限公司
数量: 1*10的6次方个
英文名: HPDE6-C7(HPDE6-C7)
保质期: 永久
保存条件: 常温/液氮保存
规格: T25瓶,1*10的6次方个

HPDE6-C7(HPDE6-C7) ;人正常胰腺导管上皮细胞
细胞名称:HPDE6-C7     人正常胰腺导管上皮细胞
组织来源:胰腺
培养条件:1640 +10% FBS
形  态:贴壁;上皮细胞样
描述
该细胞是胸腺激酶缺陷骨肉瘤细胞株。
培养条件:DMEM/F12(or MEM)  10%FBS 0.015 mg/ml溴甙)
传代方法:1:4~1:8传代;每周换液2-3次。
STR位点信息:
STR Profile AMEL CSF1PO D13S317 D16S539 D5S818 D7S820 TH01 TPOX vWA
HPDE6-C7(HPDE6-C7) ;人正常胰腺导管上皮细胞 X 12 12 10 13 13 11 12 6 11 14 18
STR鉴定图谱:请咨询销售人员
(HPDE6-C7(HPDE6-C7) ;人正常胰腺导管上皮细胞细胞培养的具体步骤和要求以及注意事项) 
一、 复苏
1. 把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。
3. 把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。
4. 标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。
5. 3天换一次培养基。
二、 传代
1. 培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。
2. 把原有培养基吸掉。
3. 加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。
4. 细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。
5. 用移液枪吹打细胞,把细胞都悬浮起来。
6. 把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。
7. 倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。
8. 根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传3个。继续培养。
三、  冻存
把细胞消化下来并离心(同上)。用配好的冻存液把细胞悬浮起来,分装到灭菌的冻存管中,静止几分钟,写明细胞种类,冻存日期。430min-2030min-80℃过夜,然后放到液氮灌中保存。
冻存液的配制: 70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加,边滴边摇。
要注意的就是无菌操作!
(培养HPDE6-C7(HPDE6-C7) ;人正常胰腺导管上皮细胞细胞的常规观察)
细胞接种或传代以后,实验者每天或至多间隔12d,要对细胞做常规性检查。观察细胞形态和生长情况以及培养的pH变化、有无污染等。根据细胞动态变化,做换液或传代处理,如发现异常情况应及时采取措施。
1. 细胞形态 生长状态良好的细胞,在一般显微镜下观察时可见,细胞透明度大、折光性强、轮廓不清。细胞生长不良时,轮廓增强,胞质中常出现空泡、脂滴和其他颗粒状物,细胞之间空隙加大,细胞形态可变得不规则甚至失去原有特点,如上皮细胞变成类上皮细胞等。某些染料当细胞死亡时能透过变性的胞膜与解体的细胞核DNA结合,而令其着色。因而常用台盼蓝(trypan blue) 鉴别细胞死活,活细胞不着色,死细胞核呈蓝色。
2. 细胞生长 初代培养或传代的细胞悬液接种以后,经过长短不同的潜伏期后开始增殖。传代细胞系、胚胎组织或幼体组织一般在第二天即可见细胞生长,一周内便可连接成片。接种细胞长满瓶壁后,应及时做再培养。否则由于营养物消耗和代谢积累,细胞即进入停止期或退化期。此时细胞轮廓增强,细胞内常出现颗粒状堆积物,为膨胀的线粒体,细胞质呈空泡化,细胞变圆、粗糙,严重时细胞从瓶壁脱落,只有及时再做传代处理,才能使细胞继续生长繁殖。
3. 营养液 正常情况下,培养液呈桃红色。如果细胞维持在pH6.56.6条件下,细胞会脱落死亡。当培养液酸化变黄时,说明培养液中代谢产物已堆积到一定量,需要更换新鲜培养液。培养液中如加Hepes或用5CO2温箱培养可使pH维持相对稳定。更换营养液的时间,可依营养物的消耗而定,细胞生长旺盛时23d换一次,生长缓慢时,34d亦可。要特别注意各种细胞对pH值要求是不一样的。
4. 微生物污染 微生物污染培养细胞培养物后会出现pH值改变,培养液呈现混浊状。细菌感染后,由于细菌的运动,光镜观察可见有微闪光;真菌感染则在镜下见许多细丝状菌丝,有时还密集有群集孢子;支原体的污染需要借助一些检测手段才可检出。细胞污染以后一般应当废弃,对于重要的细胞株,可以参考相关专著,介绍采取一些措施清除污染。比较重要的实验、珍贵的细胞,至少由两个实验人员独立培养操作,或由一个人分次(不同时)操作。除培养实验室的卫生条件外,空气中的湿度与微生物污染关系密切。重要的、周期长的实验尽量安排在空气湿度低的秋冬季进行。
 
温馨提示:不可用于临床治疗。

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