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HifairTM Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)

产品价格: ¥236.00

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发货时限:
暂无
所在地区:
中国上海
有效期至:
长期有效
最后更新:
2020-10-16 02:00:01
浏览次数:
61

产品详情

品牌名称:
Yeasen
货号: 11123ES10
供应商: 上海翊圣生物科技有限公司
英文名: HifairTM Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)
保存条件: -20℃
规格: 10 T
产品信息
产品名称 产品编号 规格 储存 价格(元)
HifairTM Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) 11123ES10 10 T -20℃ 236.00
HifairTM Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) 11123ES60 100 T -20℃ 955.00

产品描述
HifairTM Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)基于HifairTM Reverse Transcriptase而开发的即用型预混液。与HieffTM M-MLV (H-) Reverse Transcriptase相比,HifairTM Ⅱ Reverse Transcriptase热稳定性大幅度提高,可耐受高达50℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。
该预混液包含gDNA digester2×HifairTM Ⅱ SuperMix plusgDNA digester可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠。2×HifairTM Ⅱ SuperMix plus含有逆转录反应所需的所有组分(BufferdNTPHifairTM Ⅱ Reverse TranscriptaseRNase inhibitorRandom primers/ Oligo (dT)18 primer mix),只需加入RNA模板和 RNase-free ddH2O即可进行逆转录反应,并同时终止gDNA digester的作用,保证cDNA的完整性。
该产品适用于两步法RT-qPCR检测,针对qPCR进行特别优化,比例优化的Random primers/ Oligo (dT)18 primer mix,使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始,并具有相同的逆转录效率,最大程度保证了qPCR结果的真实性和可重复性。逆转录产物兼容SYBR®Green和探针法qPCR,可以根据实验目的,选择UNICONTM qPCR SYBR® Green Master MixHieffTM qPCR SYBR® Green Master MixHieffTM qPCR TaqMan Probe Master Mix等试剂配合使用,进行高性能的基因表达分析。
产品组分
编号 组分 产品编号/规格
11123ES10 (10 T) 11123ES60 (100 T)
11123-A RNase-free ddH2O 1 mL 2×1 mL
11123-B 5×gDNA digester Buffer 20 μL 200 μL
11123-C gDNA digester 10 μL 100 μL
11123-D 2×HifairTM Ⅱ SuperMix plus 100 μL 1 mL
】:2×HifairTM Ⅱ SuperMix plus含有gDNA digester抑制剂。
产品应用
适用于两步法RT-qPCR
运输与保存方法                                                                                                             
冰袋运输。-20℃保存。

第一链cDNA合成操作步骤
1. 残留基因组DNA去除
RNase free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育2 min
组分 使用量
RNase free ddH2O To 10 μL
5×gDNA digester Buffer 2 μL
gDNA digester 1 μL
模板RNA Total RNA: 1 ng -5 μgmRNA:1 ng-500 ng
2. 逆转录反应体系配制(20 μL体系)
在第1步的反应管中直接加入2×HifairTM Ⅱ SuperMix plus,用移液器轻轻吹打混匀。
组分 使用量
1步的反应液 10 μL
2×HifairTM Ⅱ SuperMix plus 10 μL
3.逆转录程序设置
标准程序(可获得高质量的cDNA
温度 时间
25℃ 5 min
42℃ 30 min
85℃ 5 min
或快速程序(适用于大多数RT-qPCR实验)
温度 时间
42℃ 15 min
85℃ 2 min
】:逆转录温度:推荐使用42℃。对于GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到50℃
逆转录产物可立即用于qPCR反应,也可-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。
注意事项
1gDNA digester2×HifairTM Ⅱ SuperMix plus含有高浓度的甘油,使用前请短暂离心收集到反应管底部,并用移液枪轻轻吸打充分混匀后,准确吸取;
2)如果加入RNA模板体积较大 (如超过2 μL),请确保RNA是溶于水中而不是TE中,因为TE会对gDNA去除以及逆转录反应产生抑制;
3)可以不经过基因组去除步骤,直接用2×HifairTM Ⅱ SuperMix plus进行逆转录,这样所得到的结果会与使用HifairTM Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix  (Cat No. 11120ES) 效果一致。但是请勿将gDNA digester11120ES中的2×HifairTM Ⅱ  SuperMix配套使用,因其不含终止gDNA digester反应的成分,会影响反转录和后续的qPCR实验;
4)反应液的配制应在冰上操作完成,操作过程应避免RNase污染;
5) 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
温馨提示:不可用于临床治疗。

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