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罗氏公司（Roche）蛋| 提供商： | 嘉美实验 |
| 服务名称： | 分子生物学：引物合成实验服务 |
实验技术简介：引物合成是通过测定引物的OD值，溶解引物，最终合成引物的一个 完善的过程。目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。亚磷酰胺三酯法合成DNA片段，具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯 法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的，合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的，相邻的核苷酸通过3′→5′磷酸二酯键连接。
实验操作流程：
1、脱保护：脱掉附加在CPG单体上的第一个碱基5’-OH基团上的保护基 (DMTr)，准备附加下一个新的碱基。
2、活化：活化新的碱基单体 (Phosphoramidite)，准备与第一个碱基进行反应。
3、偶联：第二个碱基与第一个碱基发生偶联反应。
4、封闭：将没有反应的第一个碱基的5’-OH加帽封死 (Capping)，使其不再进一步参与反应。
5、氧化：将核苷亚磷酸酯氧化成更稳定的核苷磷酸酯 （即将三价磷氧化成五价磷）。
重复进行一至五步的循环，直至合成完所需的引物 DNA序列。
6、合成结束后，将引物分子从CPG上切下，再进行进一步的纯化。
实验注意事项：
客户提供：
目标的基因序列
交付标准：
1、引物冻干粉
2. 检测报告
其他：
1、溶解引物的水pH过低或污染了菌或核酸酶，会使引物降解。
2、引物合成后，经过一系列处理和纯化步骤，旋转干燥而成无色或白色絮状干粉。
干粉：运输时常温运输，-20℃可以保存一年。
储存液：配好后分装成几管，避免反复冻融，-20℃可以保存半年。
工作液：常规使用，4℃保存，也可-20℃保存，但应避免反复冻融。
修饰荧光引物：需要避光保存，尽快使用为宜。
Tel：010-57425721/57425722 Fax：010-80780672
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