Donor vector
CRISPR是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。Cas9系统中,crRNA(CRISPR-derived RNA)与tracrRNA(trans-activating RNA)结合形成的复合物能特异性识别靶基因序列,并引导Cas9核酸内切酶在靶定位点剪切双链DNA,随后,细胞的非同源末端连接修复机制(NHEJ)重新连接断裂处的基因组DNA,并引入插入或缺失突变。多数基因组编辑过程产生单或双等位基因的比例在1-80%之间,并受制于实验室平台、细胞转染效率、细胞类型和靶点DNA。基于如此多变的编辑效果,下游细胞株的筛选十分困难。
因此,在供体Donor载体上加入荧光或抗生素标记,对基因的敲入、敲除及其有效。吉满生物提供多种抗性或荧光的Donor载体,并可以选择使用普通载体瞬转,或使用超高滴度的腺病毒载体输送供体DNA和Cas9蛋白。突变型Cas9(通常为D10A)设计为只切断gRNA靶位点DNA的一条链,再通过Donor DNA被同源定向修复(HDR)修复,比NHEJ更不易出错。
| 基因敲除同源定向修复供体Donor载体 | |
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假病毒包装技术服务
定制RNAi 腺病毒
蛋白质免疫印迹结果分析(WB结果分析

定点突变服务
pLVCT-rtTRKRAB-2SM2
稳定细胞株构建
miRNA靶基因预测与验
shRNA载体构建服务
慢病毒包装/AAV腺相关
报告基因构建与检测服
激光共聚焦(Confocal