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2×Super CanaceTM高保真文库扩增预混液

产品价格: ¥526.00

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所在地区:
中国上海
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长期有效
最后更新:
2019-06-11 16:44:11
浏览次数:
140

产品详情

品牌名称:

HB170821

2×Super CanaceTM High-Fidelity Mix for LibraryAmplification

2×Super CanaceTM高保真文库扩增预混液

产品信息

产品名称          

产品编号

规格

储存

2×Super CanaceTM High-Fidelity Mix for Library Amplification 2×Super CanaceTM High-Fidelity Mix for Library Amplification

12620ES03

12620ES08

1 mL

5×1 mL

-20ºC

-20ºC

产品描述

2×Super CanaceTM High-Fidelity Mix forLibrary Amplification是即用型预混合溶液,包含High-Fidelity DNA Polymerase(保真度是普通pfu DNA聚合酶的6倍,扩增速度达15 sec/kb),dNTP以及针对高通量测序文库扩增而精心优化的缓冲体系,具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。进行文库扩增反应时,体系只需加入引物和模板即可,简化了实验操作步骤,减少了人为误差,提高了实验通量和结果的重复性。此外,本产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。

本产品已与Hieff NGSTM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing ModuleCat#12608),Hieff NGSTM Fast-Pace DNA Ligation ModuleCat#12607)共同用于DNA文库构建,通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检,最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。

产品应用

基因克隆;复杂DNA模板扩增;高通量建库扩增。

质量控制

核酸外切酶残留检测:20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII37℃下孵育4 hDNA的电泳谱带无变化。

核酸内切酶残留检测:20 μL本品和1 μg λDNA37℃温育4 hDNA的电泳谱带无变化。

大肠杆菌残留DNA检测:50 μL体系中,加入25 μL本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。

运输与保存方法

冰袋运输。-20ºC保存。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

文库扩增反应体系(冰上配制)

1. 将表1中试剂解冻后颠倒混匀,置于冰上备用

2. 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。

1 PCR扩增反应体系

名称

体积(μL

2×Super CanaceTM High-Fidelity Mix

25

Primer 1

2.5

Primer 2

2.5

Adapter Ligated DNA

20

3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀,并短暂离心将反应液收集至管底。

4. PCR管置于PCR仪中,设置表2所示反应程序,进行PCR扩增

2 PCR扩增反应程序

温度

时间

循环数

98°C

1 min

1

98°C

10 sec

1~15(根据实验要求)

60°C

30 sec

72°C

30 sec

72°C

5 min

1

4°C

Hold

-

应用实例

使用2×Super CanaceTM高保真文库扩增预混液扩增不同GC含量(%)的DNA模板。DNA模板为3Amplicon libraryGC含量分别为38%50%70%。扩增循环数设置为12 cyclesPCR结束后使用1.0×磁珠(Yeasen Cat#12601)纯化,21 μL洗脱,取1 μL进行浓度测定。

3 Amplicon library扩增体系

名称

体积(μL

2×Super CanaceTM High-Fidelity Mix

25

Primer 1 (10 μM)

2.5

Primer 2 (10 μM)

2.5

Amplicon library (0.05 ng/μL)

20

 

4 Amplicon library扩增产量

GC%

平均产量(ng/μL

38

26.36

50

17.93

70

17.25

 

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