基因检测用口腔脱落细胞采样管

 一、基因检测用口腔脱落细胞采样管 产品用途

1.     用于采集口腔内部面颊处的脱落上皮细胞，并保存运输至实验室，做DNA检测用途。

2.     专利的产品配方，采集到的样本由冷链运输变为常温运输，变48小时可检出为7日可检出。

3.     极大提高了客户首次送样的检出率水平。避免了二次送样甚至多次送样情况的发生。

二、基因检测用口腔脱落细胞采样管 产品原理

该产品是用无菌采样拭子采集口腔内部面颊处口腔粘膜的脱落上皮细胞，运输至专业实验室进行PCR核酸扩增与基因测序。采集到的样本中，除脱落的上皮细胞外，口腔中还有细菌及DNA酶、RNA酶。细菌在25℃及以上的温度环境中，繁殖迅速，导致保存液pH值的下降。酸性的保存液环境加速上皮细胞的破裂，DNA释放出来。在DNA酶的分解下，DNA迅速降解。DNA量低至基因测序仪的最低检出线 (10ng/ml) 后，DNA将不再能被检出。（需要二次送样）

市场上现存的多种口腔脱落细胞采样管，多源于科研客户传统使用的基因测序用途的运输管。通常应用于运输时间不超过48h的冷链运输（2-8℃）。若应用到跨省普通常温快递，经常发生测序失败的情况。

友康生物作为已经占据全国病毒、细菌等传染性疾病样本采集、运输领域90%以上市场份额的企业，在样本的常温保存与有效性保障方面拥有10年专业经验。YOCON基因采样管，应用本公司专利配方，保存液内含能使DNA酶、RNA酶失活的成分，并能抑制细菌的繁殖，延缓细胞裂解和核酸降解。

三、基因检测用口腔脱落细胞采样管 产品规格

MT0801，基因检测用口腔脱落细胞采样管，50份/盒，2-25℃保存，有效期12个月

四、YOCON基因检测用口腔脱落细胞采样管能够保障：样本常温保存7日甚至更长时间，DNA均可检出

第0天

反应孔样本信息：

C3：阳性对照（Ct值13.87 ）；    E3：采集的样本（第0天，Ct值16.45）；

G3：阴性对照（ Ct值27.89）；    E4：采集的样本（第0天，Ct值15.32） 

由标准曲线y = -4.019x + 19.454可知，

采集的样本的GAPDH浓度为10.7 ug/ul。

基因测序仪的对核酸总量的最低检出线为 10ng/ul。

第0天采集到的核酸量为最低检出线的 1000 倍（1ug=1000ng）。

第2、4天

反应孔样本信息：

B2：阳性对照（Ct值13.18）；    C2：阳性对照（ Ct值19.17 ）；

E2：阳性对照（Ct值25.38）；    F2：阳性对照（Ct值29.76）；

G2：阴性对照（Ct值29.88）；    E3：（第4天，Ct值19.40）；

E4：（第2天，Ct值17.60）；

由标准曲线y=-3.937x+20.691可知，

样本第2天的GAPDH浓度为6.1 ug/ul，第4天的GAPDH浓度为2.13 ug/ul。

第2天（48小时）的核酸存量，为最低检出线的 610 倍。

第4天（96小时）的核酸存量，为最低检出线的 213 倍。

第7、12天

反应孔样本信息：

B2：阳性对照（Ct值12.76）；    C2：阳性对照（Ct值18.45）；

E2：阳性对照（Ct值23.81）；    F2：阳性对照（Ct值29.70）；

G2：阴性对照（ No Ct ）；         D4：（第7天，Ct值21.80）；

E4：（第7天，Ct值21.41）；      D5：（第12天，Ct值28.63）；

E5：（第12天，Ct值28.50）； 

由标准曲线y=-3.924x+20.003可知，

样本第7天的GAPDH浓度为393 ng/ul，第12天的GAPDH浓度为6.5 ng/ul。

第7天（24*7小时）的核酸存量，为最低检出线的 39 倍。完全可以检出。

第12天（24*12小时）的核酸存量，为最低检出线的 0.6 倍。已经无法检出。

独立第三方医学检测实验室应用YOCON采样管做出的保存7天后基因样本的凝胶电泳图片： 

样本保存7天后提取核酸，委托有第三方独立医学实验室资质的基因测序公司按测序要求PCR后，胶回收纯化，

GAPDH浓度为185ng/ul，为最低核酸最低检出线的 18 倍。（胶回收环节大约会损失50%-60%左右的核酸物质）

结论：使用友康基因检测用口腔脱落细胞采样管采集保存的样本完全满足测序要求（10ng/ul）。

五、基因检测用产品性能差异

1、口腔缠绕拭子样本与唾液样本的差异

反应孔样本信息：

B3：阳性对照（Ct值7.93）  ；    C3：阳性对照（Ct值11.27 ）；

D3：阳性对照（Ct值14.61）；    C4：阳性对照（Ct值18.04）；

D4：唾液样本（Ct值17.82）；    C4：缠绕拭子样本（Ct值19.75）；

由标准曲线y = -3.367x + 21.38可知，

唾液样本GAPDH浓度为11.4 ug/ul，缠绕拭子样本GAPDH浓度为3.05 ug/ul。

结论：唾液样本的核酸量是缠绕拭子样本的3.7倍，但考虑到唾液样本中酶类和细菌的多样性及样本不宜保存，

           应使用缠绕拭子采样。

采样拭子与唾液采样中DNA与时间对应表

2、友康基因采样保存液与PBS保存液的保存差异（均使用缠绕拭子采样）

 反应孔样本信息：

C3：阳性对照（Ct值13.73）；G3：阴性对照（Ct值31.55）                     

E3：PBS保存样本（第0天，Ct值15.35）；

F3：PBS保存样本（第3天，Ct值29.62）；

由标准曲线y = -4.019x + 19.454可知，

缠绕拭子样本第0天GAPDH浓度为10.5 ug/ul，室温放置后，第3天GAPDH浓度为3 ng/ul。

结论：友康基因采样保存液与PBS保存液保存的样本GAPDH浓度相差3500倍。

3、口腔缠绕拭子样本与植绒拭子样本的差异 

 反应孔样本信息：

B2：阳性对照（Ct值12.78）；     C2：阳性对照（Ct值16.49）；

E2：阳性对照（Ct值24.50）；     F2：阳性对照（Ct值28.87）；

B4：植绒拭子样本（第0天，Ct值23.31）；

C4：缠绕拭子样本（第0天，Ct值21.54）；   

E4：阴性对照（ Ct值31.86 ）

由标准曲线y = -4.019x + 19.454可知，

缠绕拭子样本GAPDH浓度为0.3 ug/ul，植绒拭子样本GAPDH浓度为0.11 ug/ul。

结论：缠绕拭子样本的核酸量是植绒拭子的3倍。