各位大神好！！！小弟最近遇到一个问题，我把融合的基因与T载相连，（融合基因2200bp左右）但在双酶切准备连接表达载体的时候，总出现问题，主要就是跑胶的时候不能将目的基因与T载分开，导致我根本不能将目的基因回收！！！请问有经验的大神，我该怎么办，用多少浓度的琼脂糖？？？？还有电压多久？？？？？多长时间能分开？？？？跪谢！！！小弟明年就毕业了 ，还望各位鼎力相助！！！

How big the T vector is? Do you have any gel picture?

T载用的pmd19-T 大概2700左右 ，我用的1%的胶跑了大概40分钟 还是分不开 感觉有分开的趋势 但是很模糊

Try to make a 1% long gel and load each well with 0.2-0.4 ug of digested plasmid for 10 wells or 15 wells. Run gel at 20 voltage and 30 mA at room temperature for 12-16 hours in 1 x TAE.

Thank U! I'll try !

请问你区分开了没？如何区分？