问题
1. 探针梯度稀释结果貌视正常，但所有1-10个待测样本从64倍稀释到32倍浓度时候，信号一下就没有了。
2. 样本点样呈水浸状，而不是较为均匀的斑点，如何改进。
多谢啦！
【求助】新手求解DNA dot-blot问题 有图片。提前谢过啦!
回复:8 浏览:254
- 楼主jackson
- 2011-11-04 18:49
各位大侠，我做的DNA dot-blot有问题，请各位帮忙指点
问题
1. 探针梯度稀释结果貌视正常，但所有1-10个待测样本从64倍稀释到32倍浓度时候，信号一下就没有了。
2. 样本点样呈水浸状，而不是较为均匀的斑点，如何改进。
多谢啦！
问题
1. 探针梯度稀释结果貌视正常，但所有1-10个待测样本从64倍稀释到32倍浓度时候，信号一下就没有了。
2. 样本点样呈水浸状，而不是较为均匀的斑点，如何改进。
多谢啦！
- 沙发mpark
- 2011-11-04 23:04
Try to spot the DNA samples in small volumes (less than 50 ul) on the membrane with the aid of a vacuum pump. Try to use some positive DNA and spot on the membrane with series dilutions as control in the hybridization.
- 藤椅uwijm
- 2011-11-05 16:04
多谢帮助！
我点样只有1ul啊，图片是放大的。可能是需要有机器点样可能效果比较好吧？
我点样只有1ul啊，图片是放大的。可能是需要有机器点样可能效果比较好吧？
- 板凳uwijm
- 2011-11-15 11:21
多谢，已解决
- 马扎shadow123doc
- 2015-07-02 10:58
uwijm
多谢，已解决
- 地板akinunu
- 2016-08-01 16:47
uwijm
多谢，已解决
您好！请问是怎样解决的呢？我的也不是均一的点，而是圈状。虚心学习。谢谢！
- 6楼akinunu
- 2016-08-01 17:18
shadow123doc你好，我近期也需要做DNA的dot blot，也是很纠结这个点样问题，不知道你最后是如何解决的？谢谢！uwijm
多谢，已解决
您好！请问您的这个问题解决了吗？
- 7楼shadow123doc
- 2016-08-01 23:14
akinunushadow123doc你好，我近期也需要做DNA的dot blot，也是很纠结这个点样问题，不知道你最后是如何解决的？谢谢！uwijm
多谢，已解决您好！请问您的这个问题解决了吗？B
BioRad 有专门的微量点样器，你可以试试。或者直接用小枪头点样，也是可以的。
- 8楼liulianran
- 2018-03-16 16:47
10楼
同问楼主，我也是用基因组做抗原，然后是检测5-mc，但是看文献图的旁边都有一个亚甲蓝染色的图，不知道这个就是染亚甲蓝的那个也是将同样剂量的基因组点在NC膜上，然后染色吗，具体该怎么染色呢（亚甲蓝的浓度，染色时间啥的），还有染完之后如何看呢，还望博主指导