各位大仙，有人做过5mC/5hmC的DNA斑点印迹吗？感觉网上的Protocol五花八门的，不知道到底应该怎样做>_< 抗体已经入手很久了，还是没有找到具体的方法。。。="" 哪位大神也是做这方面的呀？急求！！！="">

明年也要开始做这个了，和楼主同求~~~

请问楼主最后怎么做的，我现在也要做这个，不知道该用哪个protocol，不知楼主能否分享经验！谢谢！

想请教下楼主，您当时的DNA是怎么处理的 啊，我最近也需要做，但是不知道具体步骤，说明书写得也不详细

直接把DNA点到NC膜上了

但是说明书上说的是要把DNA超声碎成200-500bp,再点膜。请问碎的时候需要加什么抑制酶吗？还是超声直接碎？或者你是提取细胞基因组DNA后，直接点到膜上就好了？非常感谢！

超声破碎不用加酶，我其实后来没有做，我当时是没有破碎直接点到膜上的，结果不好看。。。

哦哦，那最后你就没有做这个实验啊？现在不知道这个要不要设阳性对照，我看有文献是用的SSDNA，您之前用的是什么啊？还是直接设几个浓度梯度就好了？

同问楼主，我也是用基因组做抗原，然后是检测5-mc，但是看文献图的旁边都有一个亚甲蓝染色的图，不知道这个就是染亚甲蓝的那个也是将同样剂量的基因组点在NC膜上，然后染色吗，具体该怎么染色呢（亚甲蓝的浓度，染色时间啥的），还有染完之后如何看呢，还望博主指导