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分子生物学:RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)实验服务

产品价格: ¥2000.00

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暂无
所在地区:
中国湖南长沙市
有效期至:
长期有效
最后更新:
2020-07-01 02:00:01
浏览次数:
28

产品详情

品牌名称:
提供商: 嘉美实验
服务名称: 分子生物学:RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)实验服务


实验技术简介:
RACE (rapid- amplification of cDNA ends),即cDNA末端快速克隆技术。RACE基于PCR技术基础之上,先由 RT-PCR从RNA中获取cDNA片段,再通过设计引物与PCR向两端延伸扩增从而获得完整的3'端或5'端序列,是一种从低丰度的转录本中快速扩增 cDNA的5'和3’末端的有效方法。相比于其他获得新基因的方法,RACE原理简单、无需建立文库、快速廉价,正受到越来越多科研工作者的重视。

 

实验操作流程:
1. 总RNA的提取
我们将使用TRIzol法来提取实验材料的总RNA,这一步可由您自己完成。
2. cDNA的合成与检测
反转录生成cDNA的第一链,再生成cDNA第二链,电泳检测cDNA的产量。
3. RACE 扩增
我们使用锚定PCR(AnchoredPCR)与巢式PCR(Nested PCR)相结合的方法,用Clontech和Invitrogen公司的试剂盒分别进行3'末端和5'末端RACE。
4. RACE产物检测测序
将RACE产物TA克隆并进行测序。

 

实验注意事项:
客户提供:

1、提取Total RNA的材料:动植物组织,细胞或菌液(保证材料充足);
2、或者由客户直接提供总RNA: 3’RACE:Total RNA>15μg;5’RACE:Total RNA>25μg。
2、3、序列信息:
大于200bp的已知序列(请注明已知序列的5’端及3’端):如果已知序列比较短,建议先进行3’RACE再进行5’RACE,以提高实验的成功率;
4、实验数据和参考文献:这将会帮助我们更好地理解您的实验背景,有利于实验的顺利进行。

交付标准:
1、实验报告:引物信息实验过程 PCR产物照片;
2、测序结果:测序彩色波形图、测序方向图、碱基序列图;
3、实验产物:引物、测序用质粒(限产生克隆测序的情况)

其他:
1、提取Total RNA的材料要新鲜,采样后立即存于液氮或-80℃后保存不超过一个星期,或加入防止RNA降解的样品稳定剂,如果基因的含量较低或者未知序列较长,样品量需相应增加;
2、大于200bp的已知序列(请注明已知序列的5’端及3’端):如果已知序列比较短,建议先进行3’RACE再进行5’RACE,以提高实验的成功率;


Tel:010-57425721/57425722  Fax:010-80780672   
E-mail:lab-manager@jiamay.com
Web:www.jiamay.com.cn         www.jiamay.com
400免费热线:400-0007-401
Add:北京市朝阳区北苑路旭辉·奥都7#楼2404室    P.C.:100012
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