货号: | 北京华越洋01GC44 |
供应商: | 北京华越洋 |
数量: | 大量 |
保质期: | 六个月 |
保存条件: | -80°c |
基因型
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产品说明:
DH5α感受态细胞是实验室最常用的感受态细胞,recA1和endA1的突变有利于DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。经pUC19检测转化效率为109cfu/μgDNA。
操作方法:
1.取100μl冰上融化的DH5α感受态细胞,加入目的DNA(质粒或连接产物)并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
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