RedDot复染远红光核特异性染料

货号：	40060/40061
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RedDot复染远红光核特异性染料
 
RedDot™1 和 RedDot™2是两个远红光DNA结合染料，作为核复染剂，可分别用于活细胞或者固定细胞和通透性的细胞核染色。
复染剂复染剂
RedDot™染料结合现有核复染剂（如DAPI，Draq™5和 Draq™7）优势与其他关键性的优势于一体。其光谱相似于Draq™5 和Draq™7，RedDot™染料可被几种常见的激光激发并可在远红外区激发荧光。RedDot™的激发峰值可以有效的与其他常用荧光探针区分开来（图1），从而也使RedDot™染料成为多色成像的理想核复染剂。

图1. 结合DNA的FITC，Cy™3和 RedDot™2各自的吸收和发射光谱。
RedDot™1 和RedDot™2有相似的光谱。
 
细胞通透性的RedDot™1可以快速有效的结合活细胞的核（图2）。细胞膜非透性的RedDot™2具有良好的死细胞选择性。

图2. 活HeLa细胞被 1X RedDot™1染色示意图，37℃孵育5min。
不像Draq™5和Draq™7，在通透性细胞中，如果没有额外的阻止处理步骤，细胞质也会被明显染色，RedDot™2是细胞核高度选择性染色。因此，RedDot™2是固定和通透性细胞的完美的核复染剂（图3）。

图3. 甲醛固定和洗涤通透性的HeLa细胞，使用1X RedDot2（左图）及3uM Draq7（右图）在PBS中染色10分钟。RedDot2染色是细胞核高度选择性的，而Draq7染料将细胞核与细胞质一并染色，除非使用额外的阻止步骤处理。微丝染色使用CF488A鬼笔环肽（绿色）。
 
RedDot™染料可用于贴壁或悬浮细胞以及组织切片的染色。高效耐热和耐光特性，提供了简便的步骤，更是条件要求苛刻的实验（如激光共聚焦显微镜检测）的理想选择。第2页列出了应用列表。
 
显微镜观察
RedDot™染料是优秀的核复染剂，其拥有高度的特异性，极好的耐光性及远红光激发（~680nm），其最大激发峰值可以有效的与其他常用荧光探针区分开来。该染料可以被几种激光射线激发，包括488，532，543，568，594，633，635和647 nm激发光线。这些特性使RedDot™染料成为免疫细胞化学研究和高通量筛选试验中有用工具。
 
 
流式细胞仪
RedDot™1染料可用于分析细胞周期分布。该可被一系列激光射线激发，包括488，532，543，568，594，633，635，640，647nm激发，在远红色通道的激发。

图4. RedDot1用于细胞周期分布分析。活Jurkat细胞使用1X RedDot1在37℃染色30分钟，使用BD LSRII流式细胞仪633 nm处激发和710/50 BP排放过滤器。Philip Hexley的图像系统，Shriners核心流式细胞仪设施，来自Shriners儿童医院和Cincinnati大学。
 
其他应用
RedDot™染料可用于标准化或细胞计数，用荧光酶标仪或LI-COR Odyssey近红外系统在In-Cell Western™。

 
图5 RedDot1染色HeLa细胞的细胞数量标准化。HeLa细胞接种在指定密度96孔板中。 24小时后，细胞是固定的，透性的，根据DRAQ5/Sapphire700供应商的协议，使用图中对应的染料室温下染色一小时。使用LI-COR Odyssey系统进行荧光定量。 HeLa细胞接种至每孔25,000细胞融合在检测点。
 
RedDot™1, RedDot™2,和CF™染料是Biotium公司的注册商标; DRAQ5™和Draq7™是Biostatus Odyssey®, In Cell Western™的注册商标, Sapphire700™是Li-COR Biosciences公司的注册商标; Cy™3 和 Cy™5是GE医疗集团的商标。
 
RedDot™1, 活细胞核染色;
RedDot™2, 选择性标记死细胞，固定细胞及通透性细胞的最佳核复染剂。