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Proteinase K,蛋白酶K(原装)

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中国北京
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长期有效
最后更新:
2020-06-27 02:00:01
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17

产品详情

品牌名称:
Merck
货号: 539480
数量: 现货
英文名: Proteinase K
供应商: 北京智杰方远
规格: 100mg


品名 货号 品牌 规格 单位  报价  
Proteinase K 蛋白酶K(原装)   Roche  100mg  询价  
 CB539480 Merck 100mg  280  
Amresco-0706 Amresco 100mg  280
Proteinase K
介绍
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album 
 
limber)中纯化得到。据资料显示:该酶有两个ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而
 
,如果从该酶中除去ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸
 
制品的蛋白质。所以,蛋白酶k消化过程中通常加入edta(以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化对蛋白酶k具有
 
较强耐性的蛋白,如角蛋白一类,则可能需要使用含有1mmol/l ca2+而不含edta的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGTA
 
(ph8.0)至终浓度为2mmol/l,以鳌合ca2+。
 
蛋白酶k
  蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album 
 
limber)中纯化得到。据资料显示:该酶有两个ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而
 
,如果从该酶中除去ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸
 
制品的蛋白质。所以,蛋白酶k消化过程中通常加入edta(以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化对蛋白酶k具有
 
较强耐性的蛋白,如角蛋白一类,则可能需要使用含有1mmol/l ca2+而不含edta的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGTA
 
(ph8.0)至终浓度为2mmol/l,以鳌合ca2+。   蛋白酶K,是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基
 
酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它
 
应用很广泛,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μ
 
g/ml。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性。   推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。   蛋白酶K配
 
制标准:20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinase K):将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不
 
要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
 
蛋白酶k的作用
  值得注意的是,蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结
 
合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的
 
脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果.EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果.
 
蛋白酶k的保存
  保存:保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融,有效保证12月。   孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15
 
分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。
 
温馨提示:不可用于临床治疗。

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