硒蛋白磷

   硒蛋白磷放免试剂盒说明书                       

                          SEL-P（HY-076） RIA  KIT
        硒蛋白P(Selenoprotein P)是一种糖蛋白，在人和大鼠硒蛋白P序列中分别有6个和5个潜在的糖基化位点，在人、鼠和牛硒蛋白P序列中，有2个糖基化位点是保守的。人、大鼠和小鼠硒蛋白P的氨基酸序列中含有10个SeCys，牛脑中分离的硒蛋白P样蛋白质的基因中甚至有12个可能译为SeCys的UGA密码子。在3’UTR有2个硒代半胱氨酸插入序列（SECIS）元件，另外还有两个富含His的结构域，其中一个由14个残基组成，含有8个（大鼠）或9个（人）His；另一个则含有连续7个（大鼠）或4个（人）His组成的一段序列。不同物种之间硒蛋白P的序列具有高度同源性，大多数硒代半胱氨酸密码子的位置是保守的，但在不同的物种间有一些硒代半胱氨酸与半胱氨酸发生互换。目前研究表明硒蛋白P在体内很可能主要起着抗氧化损伤的功能和通过形成复合物消除血液中P与重金属离子的毒性作用。

硒蛋白磷标本的收集：空腹抽静脉血2ml离心取血清，-20℃保存三个月。
   
  
    药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1． SEL-P缓冲液1瓶
2． SEL-P（第二抗体）1瓶，用前充分摇匀。
3． SEL-P标准品6瓶  浓度为1、2、4、8、16、32 mg/L
4． SEL-P抗体 1瓶。
5． 125I –SEL-P 1瓶   
  
     硒蛋白磷测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
                       SEL-P  RIA加液程序    （单位： ul ）
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              试   剂      T     NSB      S0     S1~S5      样  品
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              缓 冲 液    ——    200     100     ——      ——
              标 准 品    ——    ——    ——    100       ——
              样    品    ——    ——    ——    ——      100
              抗    体    ——    ——    100     100       100
              125I- SEL-P   100     100     100     100       100
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                             摇匀4℃ 放置24小时
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              分 离 剂    ——   500      500     500       500
    
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混匀，室温放置15分钟后，3500 转/分 4℃离心20 min，弃上清液，测沉淀cpm数。

  结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值，或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。
硒蛋白磷注意事项：   
      本月标准品每瓶用     0.5       ml 缓冲液稀释
      本月药盒抗体每瓶用   10.5     ml缓冲液稀释
      本月药盒标记每瓶用   10.5     ml缓冲液溶解
      本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）
   本试剂盒主要技术指标：
1、 NSB：<5%。
2、 灵敏度：<100pg/ml。
3、 标准曲线范围：0-4000ng/L
4、 批内变异系数：CVw<7.3%；
      批间变异系数：CVw < 10% 。
5、 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
                 3.125±0.658 mg/L
     本月药盒参考数据：
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           T       NSB       S0           S1        S2          S3         S4         S5     
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    CPM
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             N/T%          B0/T%        B/ B0 %   
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