货号: | xy-HOR-292 |
供应商: | 上海信裕 |
数量: | 1 |
保质期: | 6个月 |
保存条件: | 4℃保存 |
细胞名称:Recombinant Human Oxyntomodulin胃泌酸调节素
规格:5×105cells/瓶
产品说明书:咨询销售人员
细胞生长:贴壁生长
细胞形态:成纤维细胞样
细胞数量:1×106个细胞数
细胞传代:1:2 ~1:5传代;每周1~2次
细胞特性:该细胞老化前能传代42~46个倍增时间
细胞纯度:93%
细胞活力:87%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌产品注明
细胞冻存:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1 Vial)或活细胞运输(T-25 flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
我司提供的Recombinant Human Oxyntomodulin胃泌酸调节素取自新鲜的组织,按照标准操作流程分离培养。研发的Recombinant Human Oxyntomodulin胃泌酸调节素完全培养基(CM-H001)能提供细胞最佳的生长条件,降低杂细胞污染,保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时,我司还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测,保证细胞纯度在90%以上;同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
购买细胞注意事项:
1.) 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2.)仔细阅读细胞说明书,Recombinant Human Oxyntomodulin胃泌酸调节素了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3.) 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4.) 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买培养基。
5.) 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。
6.) 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
Recombinant Human Oxyntomodulin胃泌酸调节素操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育过夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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