Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF（StrepII标签蛋白纯化填料）

货号：	BTR211Q
供应商：	北京博尔西科技有限公司
数量：	大量
英文名：	Strep-Tactin Sepharose FF
保质期：	3年
保存条件：	20%乙醇4-8℃保存
规格：	10ml

Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF
（Strep-Tactin Sepharose FF）
1.产品介绍
Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF 是一种将Strep-Tactin 键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质，主要用于纯化Strep II 标签蛋白。Strep II 标签为8 个氨基酸的小标签（WSHPQFEK），由于标签小，仅为1kDa 左右，一般不影响融合后蛋白质的结构和功能，常用于融合表达蛋白质的检测和纯化。
本产品的配基Strep-Tactin 是链霉亲和素（Streptavidin）的突变体，与链霉亲和素相比，Strep-Tactin 对Strep II 标签的亲和能力至少强10 倍以上，能够在温和的条件下与Strep II 融合蛋白结合和解离。由于Strep-Tacin 对Strep II 标签具有高度特异性，一般一步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品。
Strep II 标签蛋白与凝胶结合后可使用脱硫生物素竞争方式进行洗脱，该洗脱方式比较温和，一般不会影响蛋白质的性质。如蛋白质能耐受一定的碱，也可用碱液洗脱，比如10mM NaOH 等。Strep-Tactin 琼脂糖凝胶FF 能耐受较高的碱清洗，可以用0.5M NaOH 进行再生清洗和去除热源等。另外，2-(4-羟基苯唑)苯甲酸（HABA）也可用于凝胶再生，过量的HABA 能够竞争下脱硫生物素，并且在无HABA 的缓冲液中，能将凝胶上的HABA 洗脱。
2.规格
1ml（预装柱）、5ml（预装柱）、10ml（预装柱）、20ml、100ml、500ml
3.产品性能

性能	指标
基质	6%琼脂糖微球
配基	Strep-Tactin
配基密度	≥5mg/ml
载量	≥6mg/ml Strep II标签蛋白
粒径	45-165μm
推荐流速/最大流速	20-100/700 cm/h
耐反压	0.3MPa
pH稳定范围:短时间/长时间	2~13/4~11
储存缓冲液	20%乙醇
储存温度	4-8℃

4.纯化流程
①推荐缓冲液
纯化Strep II 标签蛋白
结合缓冲液：100mM Tris-HCl，150mM NaCl，1mM EDTA，pH8.0；
或20mM NaH2PO4，280mM NaCl，6mM KCl，pH7.4
洗脱缓冲液：结合缓冲液+ 2.5mM 脱硫生物素；
或10mM NaOH
再生缓冲液：0.5M NaOH；
或结合缓冲液+1mM HABA
②样品准备
上柱的样品应尽量保持与结合缓冲液一致。通常可用透析、超滤、稀释等方法处
理样品。并且上柱前应过0.45μm 滤膜或高速离心去除不溶物。
③样品纯化
（1）平衡：取适量的Strep-Tactin 琼脂糖凝胶FF 装入合适的层析柱中，用蒸馏
水清洗5 个柱体积去除保存液，再用结合缓冲液平衡5 个柱体积，建议流速为100cm/h。
（2）上样：将准备好的样品上柱，建议流速为20-100cm/h，可根据实际结合情
况选择流速，能获得较好的效果。
（3）再平衡：上样后用结合缓冲液平衡10 个柱体积以上，或平衡至基线，洗去
杂质，推荐流速为100cm/h。
（4）洗脱：用洗脱缓冲液洗10-20 个柱体积，建议流速为100cm/h，收集的洗脱
液应立即调节pH 至稳定范围，并根据需要置换缓冲液。
（5）NaOH 再生：洗脱目的蛋白后的柱子用蒸馏水清洗3-5 个柱体积，并用0.5M
NaOH 再生3-5 个柱体积，再用蒸馏水清洗至中性，用20%乙醇保存柱子，或进行下
一次纯化。
（6）HABA 再生：用脱硫生物素洗脱目的蛋白的，还可以用HABA 缓冲液再生，
一般用HABA 的结合缓冲液洗15 个柱体积，再用结合缓冲液洗30 个柱体积，然后可
以用20%乙醇保存柱子，或进行下一步纯化。HABA 上柱后凝胶颜色会变为红橙色，
在结合缓冲液平衡后会恢复正常的白色，这种再生方式一般使用体积会大些。
5. 注意事项：
1) 使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，影响纯化效果。
2) 本产品保存条件为20%乙醇，4~8℃。
3)  2-25℃,常压,避光运输
4）仅供科研实验使用


层析柱(预装柱)填料目录：
亲和层析填料(预装柱) 
★蛋白A琼脂糖凝胶 FF (Portein A Sepharose FF)
★蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein G Sepharose FF)
★耐碱蛋白A琼脂糖凝胶 FF (rat-Portein A Sepharose FF)
★蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein AG Sepharose FF)
★镍-琼脂糖凝胶FF (Ni-Sepharose FF)
★链霉亲和素琼脂糖凝胶 FF (Streptavidin Sepharose FF)
★Strep-Tactin琼脂糖凝胶 FF (Strep-Tactin Sepharose FF) (StrepII标签蛋白纯化)
内毒素清除琼脂糖凝胶 (Endotoxin Removal Reagent Sepharose)
GST-琼脂糖凝胶FF (GST Sepharose FF)
钴-琼脂糖凝胶FF (Co-Sepharose FF)
肝素-琼脂糖凝胶 FF (Heparin-Sepharose FF)
大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶 FF (STI-Sepharose FF)
重组人源血管内皮生长因子亲和琼脂糖凝胶 FF (rh-VEGF Sepharose FF)
重组人碱性成纤维细胞生长因子亲和琼脂糖凝胶 FF (rh-bFGF Sepharose FF)
人血清白蛋白琼脂糖凝胶 FF (HSA Sepharose FF)
NHS-琼脂糖凝胶 FF (NHS Activated Sepharose FF)
环氧-琼脂糖凝胶 FF ( Epoxy Activated Sepharose FF)
 
离子交换层析填料(预装柱) 
DEAE-琼脂糖凝胶 FF（DEAE Sepharose FF）
Q-琼脂糖凝胶FF（Q Sepharose FF）
CM-琼脂糖凝胶FF（CM Sepharose FF）
SP-琼脂糖凝胶FF（SP Sepharose FF）
 
疏水层析填料(预装柱) 
苯基-琼脂糖凝胶 FF（Phenyl Sepharose FF）
辛基-琼脂糖凝胶 FF（Octyl Sepharose FF）
丁基-琼脂糖凝胶 FF（Butyl Sepharose FF）
 
凝胶过滤层析填料(预装柱) 

型号	分离范围
琼葡糖凝胶G10	<700
琼葡糖凝胶 G15	100-1500
琼葡糖凝胶 G25 (脱盐柱)	1000-5000
琼葡糖凝胶 G50	1000-30000
琼葡糖凝胶 G75	3000-80000
琼葡糖凝胶 G100	4000-120000
琼葡糖凝胶 G150	5000-300000
琼葡糖凝胶 G200	5000-600000

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