尼氏(Nissl)染色液

货号：	PT005
保存条件：	室温
供应商：	上海博谷生物科技有限公司
数量：	1
英文名：	Nissl Staining Solution
保质期：	1
规格：	100ml

产品内容：
 

1. 博谷生产的尼氏(Nissl)染色液(Nissl Staining Solution)是神经生物学家广泛使用的一种Nissl染色液，用于石蜡或冰冻切片神经元细胞浆中的尼氏小体(Nissl body)染色。
2. Nissl染色是以德国的精神病学家和神经病理学家Franz Nissl的名字命名的。
3. Nissl染色液染色后呈蓝紫色，常用于显示脑或脊髓的基本神经结构。Nissl小体大而数量多，说明神经细胞合成蛋白质的功能较强；相反在神经细胞受到损伤时，Nissl小体的数量会减少甚至消失。
4. 本Nissl染色液染色的有效成分是Cresyl violet。Cresyl violet可以和RNA或DNA结合，可以染色粗面型内质网上的核糖体，也可以染色细胞核。染色后使细胞体呈现斑驳的(mottled)蓝紫色染色。
5. 一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。
6. 室温避光保存，至少一年有效。

 
使用方法：
1. 样品处理
a) 对于石蜡切片：
二甲苯中脱蜡5-10分钟。
换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。无水乙醇5分钟；90%乙醇2分钟；70%乙醇2分钟；蒸馏水2分钟。
b) 对于冰冻切片：蒸馏水2分钟。
c) 对于培养细胞：
用4%多聚甲醛固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。
2. 尼氏(Nissl)染色
对于上述处理好的样品：
尼氏(Nissl)染色液染色染色3-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间，染色时温度提高到37-50℃对于25-50微米等较厚的切片可以使染色更均匀）。蒸馏水洗涤2次(每次数秒钟即可)。95%乙醇约5秒。此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。
注：如果用于免疫组化等染色后的复染，可以参考上述步骤在其它染色完成后直接进行尼氏(Nissl)染色。
3. 脱水、透明、封片或进行其它染色
a) 脱水、透明、封片：
95%乙醇脱水2分钟。换用新鲜的95%乙醇再脱水2分钟。二甲苯透明5分钟。
换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞呈现斑驳的蓝紫色染色。
b) 进行其它染色：
如果进行免疫荧光染色，或进行Hoechst等荧光染料的染色，在Nissl染色液染色后：
70％乙醇洗涤2次，每次2分钟。PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5分钟。然后就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色了。
 
注意事项：
 

1. Nissl染色液的染色能力很强，并且染色后很难去除，请注意勿使染色液沾染皮肤和衣物等。
2. 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片，需自备90％乙醇，无水乙醇以及二甲苯。
3. 样品数量较多时，可以使用博谷生产的染色架和染色缸，便于操作。第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。