货号: | 21-0010-01 |
数量: | 大量 |
环氧活化琼脂糖凝胶介质产品说明书
1. 产品简介
环氧活化琼脂糖凝胶介质可用于各种含有氨基、巯基或羟基的亲和配基(蛋白质、多肽、氨基酸或糖等)的偶联,应用十分广泛。该活化偶联介质以琼脂糖凝胶为基质,采用环氧活化的方法激活琼脂糖上的羟基,活化后即可直接用于各种配基的偶联。本中心开发的环氧活化偶联介质具有使用方便、偶联条件温和、偶联效率高和应用范围广(可偶联氨基、巯基和羟基)的特点。
2. 产品特性
参数 | 指标 |
基质 | 6%交联琼脂糖凝胶 |
活化基团 | 环氧基 |
形状 | 球形 |
介质平均粒径 | 90 μm (45~165) |
活化基团密度 | 20-30 μmol /ml wet gel |
偶联条件 | pH 10-13, 温度30-50 oC, 时间5-24h, 可以在水相或者有机相中偶联 |
最高流速(25℃) | 500 cm/h |
最高耐压 | 0.3 MPa (3 bar) |
保存 | 4~8 oC(50%DMSO) |
3. 应用
环氧活化琼脂糖凝胶介质可用于各种含有氨基、巯基或羟基的亲和配基(蛋白质、多肽、糖等)的偶联。具体的操作步骤如下(以10 ml活化胶偶联BSA为例):
清洗:用10-20倍胶体积的去离子水冲洗保存于50%DMSO的环氧活化胶,除去DMSO,抽干;
偶联:称取200mg BSA,溶解于10ml 0.1M碳酸钠缓冲液(pH 9.0),加入到抽干的活化胶中,在摇床上振荡,37℃偶联12-24h(反应完毕后将料液转移到砂芯漏斗中抽干,收集料液用于未偶联BSA的分析和偶联配基密度的计算,活化胶水洗后抽干);
封闭:将10ml抽干的偶联BSA的胶加入到100 ml三角瓶中,加入30 ml 1 mol/L乙醇胺溶液。反应温度恒定在37 ℃,搅拌速度120 rpm,反应时间4h。反应停止后将料液转移到砂芯漏斗中抽干,用去离子水清洗。
清洗:偶联BSA的介质依次用5倍的去离子水、0.1 M含0.5 MNaCl的乙酸-乙酸钠缓冲液(pH 4.0)、去离子水、0.1M含0.5 MNaCl的硼酸-四硼酸钠缓冲液(pH 8.0)和去离子水充分洗涤后,抽干。
保存:保存于4℃、20%乙醇溶液中。
备注:其他配基的偶联方法与BSA类似,但反应条件(pH、温度、时间、配基加入量)需要根据配基的特性和应用的需求进行适当调整。
注意事项:偶联缓冲液可用碳酸盐、硼酸盐和磷酸盐缓冲液,但绝对不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸缓冲液。
4. 其他服务
(1)提供介质筛选及工艺开发的咨询。
(2)接受客户委托开发各种分离介质(包括CNBr和NHS活化偶联介质)。
(3)接受客户委托开发各种分离工艺。
(4)按客户要求提供各种介质(疏水、离子交换、亲和)及相应规格的预装柱。
(5)为客户提供专业的售前和售后服务。