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siRNA转染试剂

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所在地区:
中国上海
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-05-30 01:30:16
浏览次数:
7

产品详情

品牌名称:
SUNBIO
货号: sunbio0004
规格: 20ul
数量: 大量
品牌: SUNBIO
供应商: SUNBIO
规格: 20ul
规格:   产品价格: ¥0
规格: 20ul 产品价格: ¥0
SunBioTM Trans-EZ siRNA转染试剂说明书

 
 
Caralog NO.STP07005 产品规格:1 ml/支 
试剂保存:4℃保存,请勿冷冻
产品介绍
SunBioTM Trans-EZ siRNA适用于绝大多数原代培养细胞和转化细胞株的siRNA转染,以抑制内源性基因或外源性基因的表达。在最佳实验条件下,转染后细胞的存活率高达90%以上,转染效率高于其他类型的转染试剂。特点:1.转染效率高; 2.细胞毒性低;3.生物稳定性高;4.适用范围广泛;5.不受有无血清及抗生素的影响;6. 操作简单,无需更换培养基。
转染概要
1. 细胞状态很大程度上影响了转染效率,推荐使用低代次细胞,并保证细胞状态良好;
2. 为优化转染条件,推荐使用Opti-MEM培养基制备转染试剂和质粒复合物;如果没有准备Opti-MEM培养基则用无血清培养基代替;
3. 为起始优化转染条件,转染细胞时可以分别用1/2、2/2、3/2、4/2、5/2转染试剂(µl)和质粒的比例(µg)分别转染;
4. 为增加实验的准确性和减少检测的误差,建议进行三个平行孔实验;
转染流程
1. 转染前一天,将细胞悬液接种到孔板中,控制细胞转染时的汇合率为70-90%。
2. 制备转染试剂和质粒的复合物:
a.取待转染质粒,用Opti-MEM培养基轻轻混匀;
b.取Trans-EZ转染试剂,用Opti-MEM培养基轻轻混匀;
c.将Trans-EZ稀释液滴加到质粒稀释液中,边加边轻轻混匀,在室温放置20分钟,使DNA和Trans-EZ充分结合形成稳定的转染复合体。
3. 取出细胞培养板,将步骤2得到的DNA-Trans-EZ复合体加入到接种好的细胞中,前后轻轻推摇孔板使混合均匀,做好标记,放回培养箱。
4. 转染24-48小时后,观察质粒荧光转染效果,或者检测Luciferase酶活性,或者收取总蛋白做WesternBlot/RT-PCR等检测。
转染系数参考
培养板型号 每孔平均底面积 铺板细胞悬液体积 DNA和稀释液总体积 Trans-EZ和稀释液总体积
96-well 0.3 cm2 100 μl 0.4-0.6μg in 7.5 μl  0.2-1μl in 7.5 μl
24-well 2 cm2 500 μl 0.8-1.2μg in 30 μl  1-2.5μl in 30 μl 
12-well 4 cm2 1 ml 1.8-2.5μg in 50μl  2-4μl in 50 μl 
6-well 10 cm2 2 ml 3.5-5 μg in 100 μl  4-8μl in100μl 
60-mm 20 cm2 5 ml 8-10 μg in300 μl  8-20μl in300 μl 
10-cm 60 cm2 15 ml 24-28μg in 800 μl  20-60μl in800 μl 
 
温馨提示:不可用于临床治疗。

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