货号: | sunbio0004 |
规格: | 20ul |
规格: | 产品价格: | ¥0 | |
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规格: | 20ul | 产品价格: | ¥0 |
Caralog NO.STP07005 产品规格:1 ml/支 试剂保存:4℃保存,请勿冷冻 产品介绍 SunBioTM Trans-EZ siRNA适用于绝大多数原代培养细胞和转化细胞株的siRNA转染,以抑制内源性基因或外源性基因的表达。在最佳实验条件下,转染后细胞的存活率高达90%以上,转染效率高于其他类型的转染试剂。特点:1.转染效率高; 2.细胞毒性低;3.生物稳定性高;4.适用范围广泛;5.不受有无血清及抗生素的影响;6. 操作简单,无需更换培养基。 转染概要 1. 细胞状态很大程度上影响了转染效率,推荐使用低代次细胞,并保证细胞状态良好; 2. 为优化转染条件,推荐使用Opti-MEM培养基制备转染试剂和质粒复合物;如果没有准备Opti-MEM培养基则用无血清培养基代替; 3. 为起始优化转染条件,转染细胞时可以分别用1/2、2/2、3/2、4/2、5/2转染试剂(µl)和质粒的比例(µg)分别转染; 4. 为增加实验的准确性和减少检测的误差,建议进行三个平行孔实验; 转染流程 1. 转染前一天,将细胞悬液接种到孔板中,控制细胞转染时的汇合率为70-90%。 2. 制备转染试剂和质粒的复合物: a.取待转染质粒,用Opti-MEM培养基轻轻混匀; b.取Trans-EZ转染试剂,用Opti-MEM培养基轻轻混匀; c.将Trans-EZ稀释液滴加到质粒稀释液中,边加边轻轻混匀,在室温放置20分钟,使DNA和Trans-EZ充分结合形成稳定的转染复合体。 3. 取出细胞培养板,将步骤2得到的DNA-Trans-EZ复合体加入到接种好的细胞中,前后轻轻推摇孔板使混合均匀,做好标记,放回培养箱。 4. 转染24-48小时后,观察质粒荧光转染效果,或者检测Luciferase酶活性,或者收取总蛋白做WesternBlot/RT-PCR等检测。 转染系数参考
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