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CIK细胞无血清培养基

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暂无
所在地区:
中国广东深圳市
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-04-10 01:30:01
浏览次数:
16

产品详情

品牌名称:
百恩维
货号: BW12002
数量: 大量
CIK细胞无血清培养基
 
 
产品描述
免疫细胞无血清培养基BW12002是百恩维生物开发,可用于免疫细胞临床治疗研究的无血清培养基,生产过程符合cGMP的标准规范。可用于人类体外组织及细胞培养过程中的应用。
 
技术手册
免疫细胞无血清培养基
 
产品货号
BW12002
 
产品规格
500ml1000ml
 
产品特点:
1、无血清培养基,无添加细胞因子
2、无异源动物成分,化学成分限定培养基
3、培养性能优越,支持高密度单核细胞培养
 
产品应用
1DC细胞、CIK细胞和NK细胞的长期增殖培养
2PBL细胞和TIL细胞的长期增殖培养
3、单核细胞和巨噬细胞的长期增殖培养
4T淋巴细胞的长期增殖培养
 
★ 操作步骤
 
培养过程:
以下过程作为常规免疫细胞培养的一般准则。如需在生物反应器或培养袋高密度培养,应优化条件来确定最佳的操作步骤。
 
T细胞培养:
1、准备新鲜的外周血单个核细胞(PBMC);或根据标准的外周血单个核细胞解冻程序,在37°C的水浴,快速解冻(<1分钟)冷冻小瓶的外周血单个核细胞
2、用生理盐水洗涤细胞,根据需要也可加入2-5%的热灭活的的人自体血浆。
3、计数细胞可以使用电子(即Coulter计数器,VI-细胞)或手动的方法(即血球计数仪)。
4、离心细胞,清除洗涤缓冲液。
5、培养初期,用含细胞因子(如IL-2)的培养基重悬PBMCCD3 + T细胞密度保持在大约0.5-1×10 6/ mL。转移细胞到相应的细胞培养容器(培养袋、培养瓶)。随后可应用各种操作激活T细胞,包括添加刺激的抗体或抗原抗原呈递细胞。无论培养T细胞的规模大小,细胞均可被隔离,激活和扩大。
6、在37℃,5CO 2的潮湿培养箱。在潮湿的气氛中,在37°C5CO2孵育培养容器。在对数生长期细胞,需要维持细胞所需的浓度。为了保持细胞指数生长期,当细胞密度超过1×10 6/ mL时,需要分离传代,维持细胞密度在0.5-1×10 6/ mL(例如,2×10 6个细胞/ mL以上,按1:4比例0.5x106细胞/ mL)。在静态平板培养中为了获得最佳的气体交换,建议培养基深度不超过11.2厘米。
 
单核细胞树突状细胞培养:
1、准备新鲜的外周血单个核细胞(PBMC)。
2、将外周血单个核细胞在铺在培养瓶中,用加入25 mL免疫细胞无血清培养基货号BW12002
3、在37℃,5CO 2的潮湿培养箱中孵育23小时。
4、弃掉含非贴壁细胞的培养基。
5、用生理盐水洗涤贴壁细胞(主要是CD14 +单核细胞)三次。
6、往免疫细胞无血清培养基添加50100 ng / mL的重组人IL-450 ng / mL的重组人GM-CSF。细胞密度应介于1~3x105细胞/ mL之间。研究者可视情况加入灭活的人自体血浆。
7、在37℃,5CO 2的潮湿培养箱中连续孵育5天。培养3天左右换液。同时添加IL-4GM-CSF
8 6天之后,细胞表现出典型的树突状细胞的形态和表面标记(细胞CD1aCD80CD86HLA-DR)。
9、向培养基中添加1μg/ mLLPS或者50μl/mLTNF-α诱导的树突状细胞的成熟。
 注:对于贴壁单核细胞也可以被磁珠分离。
 
贮藏条件
28避光保存。
 
★ 有效期
14个月
 
运输
冰袋运输
温馨提示:不可用于临床治疗。

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