G418

G418

货号：BW110031 
规格：1mL/管
浓度：50mg/mL

产品概述：G418是一种氨基糖苷类抗生素 ,在分子遗传试验中，是稳定转染最常用的抗性筛选试剂。它通过抑制转座子Tn601，Tn5 的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成，对原核和真核等细胞产生毒素 ,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。当neo基因被整合进真核细胞DNA后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA ,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。G418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。

使用方法
1. 在哺乳动物细胞中进行细胞筛选前，应先进行浓度梯度实验确定适合该类细胞的最佳药物浓度即杀死所有宿主细胞的最低浓度（一般哺乳动物细胞选用的有效浓度范围为100 - 1000 μg/ml）。
2. 细胞转染48h后,换上加入了适宜浓度G418的新鲜培养基，然后放入细胞培养箱中培养。
3. 每隔3-4天换液，更换的培养基为含相同浓度G418的新鲜培养基。
4. 筛选3-4周后，评估剩余存活细胞是否全部为转染成功克隆。另外，这些克隆的筛选时间主要依赖于宿主细胞系种类和转染筛选效率。
5. 筛选出的克隆用选择培养基传代2次后即可冻存，再进行后续实验。

运输：冰袋运输。

保存条件：﹣20℃，有效期为一年。切勿反复冻融。

温馨提示：不可用于临床治疗。