HCS工程细胞株简介

简介

一些特定的信号通路基因，如MK2，SMAD2，NF-KB等，由于其强大的生物学功能，在药物筛选和基础科研中，发挥了极大的作用。通过构建出其工具细胞株，我们可以快速，简洁的将其应用到特定靶点的药物筛选，特定信号通路的机制研究中，大大加速研究进程，并且获得高质量的数据结果。基于此，我们针对一些关键基因，通过对其的状态分析，构建了一系列工具细胞株，提供给基础与研发工作者。

原理
挑选特定的功能基因，将其构建为外源融合蛋白，使其和GFP蛋白融合，然后在工具细胞内，稳定的表达。挑选的基因编码的蛋白，是激活后分布状态有变化的基因。在特定的药物刺激，或者别的蛋白作用下，该融合蛋白在细胞内的位置会发生改变，我们通过采集图像，分析蛋白的表达和分布，来确定那些药物或者基因能激活或者抑制该信号通路。

实例

MK2工具细胞
MK2蛋白和EGFP融合，在IL-1或者TNFa的刺激下，该蛋白会从细胞核排出进入细胞质，而在IL-1或者TNFa抑制剂的作用下，重新入核。

应用

现有产品

1. 细胞名:MK2

细胞类型:U2OS
外源蛋白: human MAPKAPK2 (MK2) isoform 2 (GenBank Acc.NM_032960) fused to the C-terminus of enhanced green fluorescent protein (EGFP).
启动子:CMV  抗性：geneticin
应用:TNFα, IL-6, and IL-1介导的免疫应激

2. 细胞名:smad2

细胞类型:MDA-MB-468
外源蛋白: human Smad2 (GenBank Acc. NM_005901)fused to the C-terminus of enhanced green fluorescent protein (EGFP).
启动子:CMV  抗性：geneticin
应用: TGFβ相关的细胞生长，分化和调亡

3. 细胞名:CB1

细胞类型:U2OS
外源蛋白: human Cannabinoid receptor 1 (CB1) (GenBank Acc.NM_016083) fused to the N-terminus of enhanced green fluorescent protein (EGFP).
启动子:CMV  抗性：geneticin
应用: GPCR信号通路

4．细胞名:RAC1

细胞类型:CHO
外源蛋白: human Pak1(67-166)-EGFP (Pak1RBD-EGFP)(GenBank Acc. NM_002576) fused to the N-terminus of enhanced green fluorescent protein(EGFP) and Ha-tagged human Rac1 (GenBank Acc. NM_006908).
启动子:CMV  抗性：geneticin & zeocin
应用:RAS信号，细胞运动，细胞周期，细胞骨架组装

5. 细胞名:M2.PKA

细胞类型:CHO_K1
外源蛋白: muscarinic acetylcholine receptor 2 (M2)(GenBank Acc. NM_001006630) and the catalytic domain of human Protein Kinase A (PKAcat)(GenBank Acc. NM_002730) fused to the N-terminus of enhanced green fluorescent protein(EGFP).
启动子:CMV    抗性：geneticin & zeocin
应用: GPCR信号通路

6. 细胞名:M3.NFATc1

细胞类型:U2OS
外源蛋白: human muscarinic acetylcholine receptor 3 (M3)(GenBank Acc. NM_000740) and human NFATc1 (GenBank Acc. NM_172389) fused to the C-terminusof enhanced green fluorescent protein (EGFP)..
启动子:CMV   抗性：geneticin & zeocin
应用: GPCR信号通路

7. 细胞名:AKT1

细胞类型:CHO_hIR
外源蛋白: human Akt1 (GenBank GeneID: 207) fused to the C-terminus of enhanced green fluorescent protein (EGFP).
启动子:CMV   抗性：geneticin
应用: 生长因子，趋化因子的下游信号通路
 

8．细胞名:M1.NFATc1

细胞类型:U2OS
外源蛋白: human muscarinic acetylcholine receptor 1 (M1)(GenBank Acc. NM_000738) and human NFATc1 (GenBank Acc. NM_172389) fused to the C-terminus of enhanced green fluorescent protein (EGFP).
启动子:CMV  抗性：geneticin & zeocin      
应用: GPCR信号通路

9. 细胞名:NFKB

细胞类型:U2OS
外源蛋白: human NFκB (GenBank Acc. NM_021975) fused to the N-terminus of enhanced green fluorescent protein (EGFP).
启动子:CMV  抗性：geneticin      
应用: 肿瘤炎症相关信号