慢病毒包装服务 超速离心纯化 更适于动物实验

慢病毒包装服务
慢病毒介导的基因传递已与腺病毒、腺相关病毒一起成为最流行的基因传递工具。具有可用于瞬时或稳定表达的优点，可感染分裂期和间期的细胞。
Vigene 为您提供了从基因克隆到慢病毒载体构建、慢病毒包装的一整套服务。凭借拥有业内最大的18000个人类全长cDNA克隆库的优势，可在2-3周内生产出高滴度的慢病毒产品。

海马神经元细胞共聚焦影像树状神经网络：慢病毒（带GFP标签）感染
体外培养海马神经元细胞，21天后共聚焦显微镜拍摄影像

主要优点：

• 18000个现货cDNA

克隆可在2-3天由穿梭载体克隆至慢病毒载体,2周即可交付慢病毒
• 1270个现货人源miRNA克隆可以穿梭至慢病毒载体进行瞬时或稳定表达
• 多种慢病毒载体可供选择，C-端或N-端带有荧光标记（GFP、RFP)和亲和标签
• 多种 shRNA 的慢病毒载体及4in1shRNA载体可用于RNAi研究
• 可根据客户要求提供不同滴度（高或低）的慢病毒产品
• 严格的质量控制：基因特异引物检测、Real-time PCR病毒滴度测定
• 可将您感兴趣的任何基因克隆至我们的慢病毒载体进行慢病毒生产
•  我司慢病毒均采用超速离心纯化方式纯化，更适用于动物实验

病毒纯化与浓缩:

                   Q-PCR测定滴度，纯化浓缩后的慢病毒滴度达
               到2.5x10E10 GC/ml，几乎比未纯化病毒多三个数
               量级。
                   感染HEK293细胞48h后，计算被慢病毒感染阳性
               GFP细胞，GFP感染的单位 在4.6x10E9IU/ml,而未
                纯化浓缩的慢病毒只有2.3x10E6 IU/ml。











     相同体积未纯化和纯化浓缩后慢
病毒感染HEK293细胞（2ml细胞培养
皿加入1ul病毒颗粒），48h后荧光显
微镜拍照，纯化浓缩后的慢病毒显著
地增强GFP表达和阳性GFP细胞数。



 

客户案例分享:

高浓度纯化shRNA 慢病毒感染皮层神经元细胞，抑制内源性基因表达。

1. Western blot 检测shRNA 慢病毒抑制内源性基因X表达

 

   
    慢病毒 shRNA（抑制基因X表达）和
对照分别感染培养的皮层神经元细胞 ，
感染96h后，Western blot检测相关蛋白
表达，凝胶显示，几乎完全抑制了基因X
的表达。



 

      2. shRNA慢病抑制内源性基因X在细胞核中的表达

          内源性基因X在皮层神经元细
      胞核内表达。shRNA 慢病毒（带
      GFP标签）感染神经元细胞，14天
      后：（1）左上图，神经元细胞核
      经DAPI染色;（2）右上图，细胞
      与anti-GeneX 抗体相互作用（红色
      ）;（3）左下图，shRNA在神经元
      细胞内表达（GFP标签）;（4）从
      右侧上下两图可以看出在GFP阳性
      神经元中基因X表达几乎完全被抑
      制(箭头所示)。


 

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