货号: | EMIF01 |
样本: | 血清、血浆、细胞培养上清 |
标记物: | 链霉亲和素-HRP |
检测方法: | 双抗体夹心 |
检测限: | 15.6pg/ml |
供应商: | 北京百智生物科技有限公司 |
数量: | 大量 |
【项目简介】
IFN-γ的主要由活化T细胞产生,在小鼠中,由Th1亚群产生。当抗原、PHA或ConA刺激后T细胞分泌IFN-γ,通常与IL-2的产生一致。此外,活化NK细胞也可以产生IFN-γ。人和小鼠IFN-γ基因分别定为于12号和10号染色体上,在DNA水平上IFN-γ基因与IFN-α/β基因无同源性。人和小鼠IFN-γ在DNA水平上有65%左右同源性,在氨基酸水平上有40%左右。小鼠成熟IFN-γ分子由133个氨基酸组成。人IFN-γ成熟分子是由143个氨基酸组成的糖蛋白,以同源双体形式存在,分子量40KD,其生物学作用有严格的种属特异性,人IFN-γ只作用于人或灵长类动物的细胞。IFN-γ诱导单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞等MHCII类抗原的表达,使其参与抗原递呈和特异性免疫的识别过程。
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标微孔板上预包被有大鼠抗小鼠IFN-γ抗体,当加入标准品和待测样本时,重组或天然的小鼠IFN-γ会和该抗体结合。洗板后,游离的其他成分被洗去,加入生物素化的山羊抗小鼠IFN-γ抗体可与被酶标板捕获的小鼠IFN-γ结合。再次洗板后,游离的其他成分被洗去,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,生物素和链霉亲和素特异性结合,形成“包被大鼠抗体+小鼠IFN-γ+生物素化山羊抗体+链霉亲和素-HRP”免疫复合物。当加入TMB显色底物后,复合物上连接的HRP催化底物反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。在450nm处测定OD值,小鼠IFN-γ浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠IFN-γ的浓度。