MCF-7

MCF-7
MCF-7基本信息       

组织来源：乳房/乳腺，来源于转移部位：胸腔积液

培养特性：贴壁

细胞属性：该细胞保留了分化的乳腺上皮细胞的多种特性。

疾病类型：乳腺癌

生物安全等级：BSL-1

细胞检测       不含有HIV、HBV、HCV、支原体、细菌和真菌。

用途               仅限于科研，不用于临床诊断和治疗。

储存条件       液氮储存

培养基           90% DMEM (高糖) + 10% 胎牛血清 (v/v)

冻存液           90% 胎牛血清 + 10% DMSO (v/v)  

使用方法
本方法以 T25 cm²透气细胞培养瓶为例说明，如为其它规格的细胞培养器皿，请相应的增加或减少细 胞培养基、胰酶等用量。
细胞复苏：从液氮罐中取出细胞，迅速放入 37℃水浴锅，于 1-2 min 内融化，低速离心，用 PTCM 重 悬细胞，接种于 T25 cm²细胞培养瓶中，培养基体积补至 5 mL。
细胞换液：细胞贴壁 24 h 后，若有漂浮细胞，需换液（在培养过程建议隔 2 天换液）。吸掉上清，用 PBS 缓冲液（不含钙镁离子）轻轻润洗细胞，加入新鲜培养基继续培养。
细胞传代：细胞融合度达 80-85% 即可进行传代。
1）吸弃原细胞培养液，用 PBS 缓冲液（不含钙镁离子）轻轻润洗细胞 2 次。
2）加入 0.6 mL 0.05% 胰酶-EDTA，轻轻晃动细胞培养瓶，使消化液铺满整个细胞层后，置于 37℃ 孵育 2-7min（视细胞贴壁能力而定），当 90%细胞从培养瓶脱落后，加入 1 mL 终止液（含 10%血清 的 PBS）终止。
3）收集细胞悬液全部转移至 15 mL 离心管中，离心 4 min（1000 rpm，室温）。
4）吸弃上清液，用培养基重悬细胞后接种到新 T25 培养瓶中（建议传代比例 1：2-1：4，传代细胞 数为 0.5-1×10 6），培养基体积补至 5 mL 继续培养。