人类白细胞抗原G(HLA-G) 检测试剂盒

本试剂仅供研究使用  标本：组织匀浆

 

HLA-G试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知HLA-G浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将HLA-G和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中HLA-G的活性浓度呈比例关系。

 

 

1．  蒸馏水。

2．  加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3．  振荡器及磁力搅拌器等。

 

1．  避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2．  实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3．  不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

 

1．  试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2．  实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3．  不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4．  使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5．  使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6．  洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7．  底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8．  加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9．  按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

 

1、  血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、  血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、  细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、  保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

1．  标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

 

2．  洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

 

1．  使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2．  根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3．  加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4．  甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5．  每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6．  甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7．  每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8．  取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9．  在450nm波长处测定各孔的OD值。

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

 

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

 

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的HLA-G标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的HLA-G含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

 

3、检测值范围：0-400pg/ml

 

4、敏感度： 1.0pg/ml
中文名称：人己糖激酶1(HK1)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1)
中文名称：人中期因子(MK)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Midkine (MK)
中文名称：人谷胱甘肽S转移酶α1(GSTα1)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1)
中文名称：人谷胱甘肽S转移酶α5(GSTα5)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 5 (GSTa5)
中文名称：人C-型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for C-Type Natriuretic Peptide (CNP)
中文名称：人氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Hexosaminidase B Beta (HEXb)
中文名称：人补体因子H(CFH)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Complement Factor H (CFH)
中文名称：人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Trypsinogen Activation Peptide (TAP)
中文名称：人成纤维细胞生长因子7(FGF7)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 7 (FGF7)
中文名称：人内脂素(VF)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Visfatin (VF)
中文名称：人高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for High Density Lipoprotein (HDL)
中文名称：人低密度脂蛋白受体(LDLR)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor (LDLR)
中文名称：人低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor Related 
中文名称：人Runt相关转录因子2(RUNX2)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Runt Related Transcription Factor 2 (RUNX2)
中文名称：人α1-抗胰糜蛋白酶(α1ACT)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Alpha-1-Antichymotrypsin (a1ACT)
中文名称：人α2-巨球蛋白(α2M)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Alpha-2-Macroglobulin (a2M)
中文名称：人α-乳清蛋白(αLA)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Alpha-Lactalbumin (aLA)
中文名称：人血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 4 (ANGPTL4)
中文名称：人淀粉样前体蛋白(APP)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Amyloid Precursor Protein (APP)
中文名称：人连环蛋白β1(CTNNβ1)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Catenin Beta 1 (CTNNb1)
中文名称：人神经介素U(NMU)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Neuromedin U (NMU)
中文名称：人泛素激活酶样蛋白(UBE1L)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein (UBE1L)
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中文名称：人磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Glypican 1 (GPC1)
中文名称：人Dickkopf相关蛋白2(DKK2)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Dickkopf Related Protein 2 (DKK2)
中文名称：人粘蛋白4(MUC4)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Mucin 4 (MUC4)
中文名称：人生长激素受体(GHR)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Growth Hormone Receptor (GHR)
中文名称：人吡啶酚(PYD)ELISA试剂盒价格96t/48t    英文名称：ELISA Kit for Pyridinoline (PYD)

温馨提示：不可用于临床治疗。