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免疫共沉淀（CoIP）实验技术服务
蛋白纯度及定量分析
蛋白质组学：蛋白表达与纯化实验技术
[VIP第1年] 指数:3
通过嘉定区市场监管局认证 
蛋白质纯化实验服务
NF-KB p65活性检测实
MALDI-TOF/TOF质谱鉴
DIGE技术实验服务
多肽合成与修饰技术服
蛋白双向2D-WB 电泳实
病理切片实验技术服务| 提供商： | 晶莱生物 |
| 服务名称： | (原核)可溶蛋白表达实验服务 |
| 规格： | 实验 |
实验技术简介：原核蛋白表达是指通过基因克隆技术，将外源目的基因，通过构建表 达载体并导入表达菌株的方法，使其在特定原核生物或细胞内表达。这种方法在蛋白纯化、定位 及功能分析等方面都有应用。目前，用于原核表达的主要宿主菌是大肠杆菌。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下优点：易于培养，易于生长和控制；可选择多种大肠 杆菌菌株及与之匹配的各种表达载体。
原核表达系统是迄今为止最为成熟可靠的蛋白表达系统，但是某些特殊的表达载体与宿主菌不相容，也可能会导致 目的蛋白无法表达。或者有时表达出的目的蛋白不 可溶。嘉美生物拥有丰富的蛋白表达经验，能够解决原核蛋白表达过程中的各种困难，在最短的时间内满足客户的蛋白表达需求。
实验描述
载体特色：
1、携带cspA低温诱导启动子，11度低温 诱导，促进蛋白溶解，增加可溶性蛋白几率
2、携带SD序列，增加蛋白起始密码子翻译效率
3、构建TEE序列，转录增强，增加蛋白表达水平
4、AMP抗性筛选
载体特色：
1、携带cspA低温诱导启动子，11度低温 诱导，促进蛋白溶解，增加可溶性蛋白几率
2、携带SUMO融合蛋白，形成三级空间结构，有助于蛋白形成正确折叠
3、SUMO酶特异性切割融合蛋白，重组蛋白N端无氨基酸残留
4、Kan抗性筛选
原核蛋白表达纯化服务内容
1、靶基因序列设计，密码子优化
2、靶蛋白cDNA阅读框的设计和全长基因的合成
3、表达载体的构建
4、质粒的转化和高表达菌株的筛选
5、摇瓶培养，诱导表达
6、蛋白的纯化
7、蛋白浓度与纯度检测
实验流程
1、根据实验要求，进行人工合成全基因或克隆靶基因，并亚克隆到原核表达载体中。最后向客户提供质粒及测序报告。
2、质粒的转化和高表达菌株的筛选，通过SDS-PAGE蛋白电泳结果或者WB检测目的条带
3、采用较合理的纯化方案，纯化获得1-3mg左右蛋白
4、对蛋白纯度，浓度等检测，按照客户要求进行分装或冻干
5、提供实验数据报告
1、无污染的含表达载体的重组质粒，最小量不得低于100ng
2、原始质粒图谱及序列文件
3、插入基因后质粒的商业测序报告
4、目标蛋白质相关信息
5、其他具体细节要求
客户须知
1、无污染的质粒，最小量不得低于100ng
2、原始质粒图谱及序列文件
3、插入基因后质粒的商业测序报告
4、目标蛋白质相关信息
5、最终蛋白一般保存在常规的缓冲液中（Tris-HCl，PBS）
6、我们提供Western Blot的检测服务
交付标准
1、1-3mg蛋白
2、纯度>70%
3、表达菌株
4、实验报告
适用客户
本套餐特别适用于已经尝试过蛋白表达小试，结果为两种情况
- 无表达或表达量偏低
- 有表达但蛋白为包涵体。针对此类情况，我们的重点是优化表达条件，提高表达量，取得可溶性表达蛋白。
欢迎咨询详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
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