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2X 一步法逆转录PCR(RTPCR)试剂

产品价格: ¥800.00

最小起订量:暂无 可售数量:999盒

发货时限:
暂无
所在地区:
中国北京
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-05-31 01:30:04
浏览次数:
23

产品详情

品牌名称:
北京佳兰
货号: JLEM004
保质期: 1年
保存条件: -20℃
规格: 100T(50ul体系)
通用型一步法RT-PCR试剂盒说明书100T 
    本试剂盒适用于对各种动、植物、病毒RNA进行RT-PCR 检测。用户可根据被分析基因,配合一对引物,或同时采用Taqman荧光探针,先将提取的RNA反转录(reverse transcription).成cDNA,再经过聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)技术对特异性片段进行扩增,进行电泳或实时荧光分析。
    一步法RT-PCR可使逆转录及PCR过程在单管中完成,比分开进行逆转录及PCR更方便。由于不需要在逆转录完成后打开反应管,尽可能地避免了样品间的相互污染。
规格
    100人份(50μl体系)
适用仪器
    适用于各种普通PCR仪器和实时荧光PCR仪器。
试剂盒组成
1 2 ×RT-PCR 反应缓冲液 2600μl
2 酶混合液 200μl
反应体系
    根据下表配制反应液:
  试剂名称 浓度 荧光PCR用量 普通PCR用量
1 无RNA酶的水 - 22.3-X μl 22.9-X μl
2 2 ×RT-PCR 反应缓冲液 - 25 μl 25 μl
4 引物 1 20 μM 0.5 μl 0.5 μl
5 引物 2(reverse) 20 μM 0.6 μl 0.6 μl
6 Taqman荧光探针 20 μM 0.6 μl -
7 酶混合液 - 1 μl 1 μl
7 RNA模板 - X μl X μl
如果同进行多个反应,先按比例配成混合液,振荡混匀后,按每管 50-X μl(X为模板量)分装。
PCR扩增
    将配制好的反应体系混匀、离心后,置普通PCR仪器或实时荧光PCR仪器上进行扩增及实时检测。
扩增程序:
  温度 时间 循环数
1 50℃ 10-30分钟 1
2 94℃ 5分钟 1
3 94℃ 30 秒 40
50-60℃ 30 秒
72℃ 1kb/60 秒
4 72℃ 10分钟 1
5 4℃ 保温
结果判断
    扩增产物可直接进行电泳检测;实时荧光检测可根据相应仪器的配套软件进行结果分析。
保存及有效期
    -20℃保存,有效期为12个月。
注意事项
1. 开始检测前请仔细阅读本说明书全文。
2. 整个检测过程中,反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增(荧光检测)应分区进行以避免污染。
3. 操作人员应戴口罩,经常更换一次性手套,以避免RNA酶的污染;实验中所用器具均应经过除RNA酶处理。
4. 试剂盒组成中的试剂使用前应充分融化并混匀。
5. 进行实时荧光分析时,.荧光探针应避光保存,加入缓冲液中后,应尽快进行扩增。
6. 如一次不能用完,请按用量分装保存,应尽量避免反复冻融。
温馨提示:不可用于临床治疗。

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