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M-MLV逆转录酶(RNaseH-)/MMLV反转录酶

产品价格: ¥250.00

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暂无
所在地区:
中国北京
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-06-01 01:30:02
浏览次数:
22

产品详情

品牌名称:
佳兰
货号: JLE001L
保存条件: -20℃
英文名: M-MLV reverse transcriptase
保质期: 1年
供应商: 佳兰生物
数量: 大量
规格: 10000U

产品说明:逆转录酶能以RNA或单链DNA为模板起始合成互补的DNA链。MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-)M-MLV逆转录酶的突变型,点突变去除了RNase H的活性中心,使RNase H的活性降低,减少了逆转录反应中RNA的降解,使cDNA第一链的得率增加,更容易获得全长cDNA

 

来源:E.coli 菌株,含有突变型莫洛尼氏鼠白血病病毒(M-MLV)逆转录酶基因。 

产品应用:第一链cDNA的合成;RT-PCR反应。

 

 

产品纯度: 200U的本酶和1μg16S23S rRNA37下孵育1h,电泳条带无肉眼可见的变化。

 

推荐的反应条件:

cDNA第一链的合成

1) 在无RNasePCR管中加入:Oligo dT12-18 (1μg/μl)或随机引物(50-250ng)1μlTotal RNA (10ng-5μg)mRNA(1-500ng)xμldNTP (10mM each)1μlDEPC ddOH2 (14-x)μl

2) 70保温10分钟后迅速冰浴2-10分钟。

3) 离心数秒使反应液聚集于PCR管底部。

4) 向上述反应液中加入:5×RT Buffer 4μlRNasin (40U/μl) 1μl;轻轻吸打混匀。

5) 42保温2分钟(Oligo dT12-18或基因特异引物);如果是随机引物则25保温10分钟。

6) 加入1μl MMLV逆转录酶,混匀后42保温50分钟。

7) 70 保温15分钟后置冰上冷却,得到cDNA。该产物可直接用于第二链的合成或RT- PCR扩增反应,保存请置于-20

温馨提示:不可用于临床治疗。

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