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琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

产品价格: ¥260.00

最小起订量:暂无 可售数量:999盒

发货时限:
暂无
所在地区:
中国北京
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-05-25 01:30:01
浏览次数:
56

产品详情

品牌名称:
天漠科技
货号: TD407- 50
供应商: 天漠科技
英文名: TIANMO BIOTECH
保质期: 1年
保存条件: 室温
规格: 50次

 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
 
Catalog No. TD407- 10   (10次反应)                 TD407-50   (50次反应)
                    TD407-100 (100次反应)              TD407-200 (200次反应)
特点
 
  • 可在10 µl 的少量水中回收到超纯的DNA,并且对于一系列下游的分子生物实验非常理想.
  • 此过程与 TAE 或者 TBE缓冲的凝胶是兼容的. 无需像其它试剂盒那样调整 pH.
  • 切下范围在75bp10kb之间的DNA回收率为95%. 并且不会发生像常在玻璃奶和基于阳粒子树脂过程中的DNA切变现象.
  • 本产品仅供科研使用
 
 
组件名称    规格(50次反应)        规格(200次反应) 保存温度
溶胶液      50 ml                                 2 X100 ml       常温
DNA 洗涤液   6 ml                                   24 ml       常温
DNA 洗脱液     1 ml                                     4 ml 常温
1号柱  50                                   200      常温
收集管  50                                   200      常温
Note –售出后一年内产品质量是可以保证。 试剂已经过大量的常规检测来保证其可操作性。此产品仅供研究并且需要由专业人员来使用。
试剂盒中的部分试剂是有刺激性的。  请带好手套和防护眼镜。
                                                                                                                                                                                                                               Ver.1.0.6
                                                                                                                                                                                                                    
试剂制备
DNA洗涤液 在使用之前一定要配好,添加好乙醇后在试剂瓶上做好标记!!!
10次反应的DNA洗涤液 已经添加乙醇无需添加。
50次反应的DNA洗涤液 应添加24 ml 100%的乙醇到6mlDNA洗涤液中。
100次反应的DNA洗涤液 应添加48 ml 100%的乙醇到12mlDNA洗涤液中。
200次反应的DNA洗涤液应添加96 ml 100%的乙醇到24mlDNA 洗涤液中。
 
特性
  • DNA 纯度 在水中洗脱的高质量、纯化的 DNA尤其适用于DNA 测序, DNA 连接, 限制性内切酶消化, DNA放射性标记等分子生物学实验。
 
  • DNA 大小 –50 bp 23 kb之间。
 
  • DNA 回收率一般的,可在10 µl的水中洗脱出5 µg DNA。对于从50bp10kbDNA,回收率为70-90%,从11kb23kbDNA,回收率为50-70%
 
  • 样品来源来自 PCR 限制性内切酶消化, 质粒抽提, 激酶反应,等的DNA和在TAE TBE缓冲的 琼脂糖凝胶切片中的DNA
 
 
 
特点
 
  1.       使用了优质溶胶液,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
  2.       溶胶液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
  3.       改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
  4.       快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。
  5.       pH≤7.5时,吸附膜吸附DNA的效率最高。如果切下来的凝胶中含有电泳缓冲液太多,造成溶胶后溶胶液pH偏高,会导致回收率降低。
 
 
操作方案
以下离心操作步骤的离心力均在10,000 - 16,000 x g之间进行。
  1. 使用刀片或手术刀把DNA片段从琼脂糖凝胶上切除下来并且移置到 1.5 ml 小型离心管内.
Note:  从凝胶上切下的琼脂糖尽可能的要少.
 
  1. 3 倍体积的  溶胶液  添加到每1体积从凝胶上切下的琼脂糖切块中.
Example: 对于 100 µl (mg) 的琼脂糖凝胶切块,添加 300 µl ADB 缓冲液.

 
  1. 37-55°C 下温水浴 10 分钟直到凝胶切块完全溶解.
Note:  确定凝胶切块完全溶解是很重要的步骤在温水浴过程中可辅以温和的搅拌有助于凝胶的溶解。如果DNA大小超过8kb,加热之后需要额外添加等量胶块体积的水。例如:100 µl (mg) 的琼脂糖凝胶切块,添加 300 µl ADB 缓冲液.加热之后添加100µl的水。
 
  1. 将溶解的琼脂糖切块溶液放到  1号柱 中并把柱套在 收集管 .
 
  1. 离心1分钟去除滤出液.
                  Note:  柱所能容纳的样品体积为 800 µl.  所以, 如果样品体积超过800 µl时,柱就要被多次填充和离心。
 
  1. 添加 200 µl DNA 洗涤液 到柱中离心1分钟,去除滤出液
 
  1. 重复第6步洗涤步骤.
 
  1. 可选步骤:将收集管中的废液倒掉,并将1号柱套回收集管中额外离心2分钟,尽量除去洗涤液, 以免洗涤液中残留乙醇抑制下游反应。
 
  1. 直接添加 10 µl DNA洗脱液到柱基质中将柱套在 1.5 ml 离心管中离心1分钟来洗脱 DNA.
Note:  从柱中洗脱出的DNA 产量与pH 和温度有关如果使用水来洗脱, 确保 pH >6.0. 在向柱中加入水后静置1分钟可增加较大 (> 6 kb) DNA的产量. 60-70oC 的水中洗脱DNA可增加较大DNA (> 10 kb)的产量
 
Note:  如果试验需要的话 TE 缓冲液 (10 mM Tris-HCl 1 mM EDTA pH 8.0) 或改进的 TE (10 mM Tris-HCl 0.1 mM EDTA pH 8.5) 也可用来洗脱.
 
在水中得到的超纯DNA可进行后续试验.
 
温馨提示:不可用于临床治疗。

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